生物制剂的 cIEF 和 CZE 电荷异质性分析

使用高速、高分辨率毛细管等电聚焦和区带电泳确定蛋白质异构体电荷异质性

经过优化的方法能够实现高分辨率电荷异质性表征。

使用 PA 800 Plus 制药分析系统的毛细管等电聚焦 (cIEF) 应用已进行优化，可以为您提供一种适用于多种 MAb 分子的平台分离方法。在上图中，使用相同的分离条件可以实现三种不同治疗性 IgG 的高度解析。

cIEF 是一种先进技术，可对基于等电点 (pI) 分离的蛋白质进行超高分辨率的定量分析。您也可以使用毛细管区带电泳 (CZE) 在减少样品制备需求的情况下更为迅速地获取高分辨率电荷异质性信息。

PA 800 Plus 制药分析系统能够自动运行先进的 cIEF 和 CZE 技术，实现高精度和定量分离。在 cIEF 中使用优化方法与合成 pI 标记物可以获得最高精度的 pI 预估和直接异构体定量。

• 在 cIEF 中，会将样品和两性电解质的混合物导入一根毛细管中并进行电泳分离。在这一过程中，会形成一个 pH 梯度，分析物会通过该梯度向其各自的 pI 迁移。已实施针对多个试验参数的全面优化 (AIB A-11634A)。相较于 CIEF，CZE 的复品制备需求简单，能够快速地生成电荷异构体异质性数据，同时具有非常高的分解率和重现性。展现出耐用性和可移植性的公司间合作研究试验已应用于生物制药行业的 CIEF (1) 和 CZE (2) 两个领域。在实验室间成功转移和实施表征试验取决于方法能否最大程度减小环境和操作员可变性。

必要耐用性的一个重要指标是中间精密度。在 PA 800 Plus 系统上实施先进的 cIEF 和 CZE 能够提供：

• pI 重现性 <1% (CIEF)
• 峰迁移时间重现性 <3% (CZE)
• 峰面积重现性 <3% (CIEF/CZE)

---

为您的 cIEF 分析量身打造的试剂
Beckman Coulter 的 cIEF 肽标记物试剂盒（部件号 AS8481）采用合成肽。先进的 cIEF 方法、合成 pI 标记和 PA 800 Plus 系统的组合能够实现最高精度的 cIEF 分离，对您的样品进行 pI 测定和异构体定量。试试先进的 cIEF 起始试剂盒（部件号 A80976），其中包含您需要的大部分工具。

相关出版物：

• Scott Mack et al.(2009) A systematic study in CIEF:Defining and optimizing experimental parameters critical to method reproducibility and robustness.Electrophoresis 2009, 30, 4949-4058
• Salas-Solano O et al.(2011) Intercompany Study to Evaluate the Robustness of Capillary Isoelectric Focusing Technology for the Analysis of Monoclonal Antibodies.Chromatographia.73:1137-1144 Moritz B et al. J Chromatography B. article in press.

治疗性单克隆抗体的高分辨率 cIEF：涵盖 pH 4-10 的平台方法