葡萄果实中多酚的快速分离液相色谱/质谱检测和定量

Cavaliere C, Foglia P, Gubbiotti R, Sacchetti P, Samperi R,Laganà A.Rapid Commun Mass Spectrom. 2008 Oct;22(20):3089-99.

摘要：建立了葡萄皮和葡萄籽中多酚的快速分离液相色谱/质谱(RRLC/MS) 检测和定量方法。无果肉葡萄皮用液氮处理，并研磨;对葡萄籽也进行研磨。然后取3 g 样品用30 mL 甲醇/水/甲酸70:30:1 (v/v/v) 超声下提取，将1 微升最终提取物注入两根串联的100 x 2.1 mm 内径，1.8 微米Zorbax Eclipseplus C18 柱中。用酸化的乙腈/甲醇50:50 (v/v) /水进行梯度洗脱，对化合物进行分离。柱温恒定在70 °C。用配置电喷雾离子源的安捷伦6410 三重串联四极杆质谱仪进行质谱分析。采用正离子和负离子MS/MS 子离子扫描进行化合物鉴定，采用m/z 范围200-1400 的正离子全扫描质谱进行定量。通过对质谱图进行比对，鉴定出了多种黄酮醇、黄烷-3-醇、花青素和芪类化合物。用外标法进行定量，浓度值扣除了基质效应，基质效应由其它实验检测。对没有市售标准品的化合物进行了半定量测定。回收率为90-102%，相对标准偏差(RSD) <5%，样品之间的RSD 为4-12%。用两种代用标准品进行质量控制。用上述方法比较了三种成熟期和贮存6 周的酿酒葡萄中的多酚的含量。结果显示，贮存过程中多酚含量减少了一半。