用亲水相互作用色谱/串联质谱法定量测定皮下组织微透析液中的乙酰胆碱

Fu B, Gao X, Zhang SP, Cai Z, Shen J. Rapid Commun Mass Spectrom. 2008 May; 22(10): 1497-502.

摘要：最近有报导乙酰胆碱在组织炎症调节方面发挥重要作用。为了进一步探讨这一新发现的类胆碱能抗炎途径，需要追踪组织中乙酰胆碱的浓度变化。本文报导了一种亲水相互作用色谱与电喷雾电离串联质谱(HILIC/ESI-MS/MS) 联用方法，用于分离和定量测定正常与局部炎症大鼠微透析液样品中的乙酰胆碱。采用两性固定相色谱柱等度洗脱实现了乙酰胆碱与干扰性内源性化合物和无机阳离子的分离。用正离子模式的低能量碰撞诱导解离串联质谱(CID-MS/MS) 分析，采用以下质量跃迁进行多反应监测(MRM)：乙酰胆碱m/z 146 —> 87，内标乙酰胆碱D-9 m/z 155 —> 87。乙酰胆碱的柱上检测限为0.075 fmol (信噪比3:1)。柱上最低定量限为0.25 fmol。绘制了乙酰胆碱在空白微透析液中的校正曲线，线性范围为0.025-50 nM 和0.025-0.5 nM，相关系数分别等于或大于0.9994 和0.9969。高浓度(2 nM) 和低浓度(0.5 nM) 乙酰胆碱的回收率分别为90-96% 和95-109%。日内和日渐重现性的变异系数分别等于或小于7.3% 和10.4%。已将本方法成功地用于正常和炎症大鼠组织微透析液中乙酰胆碱的测定。