伯乐新一代超高灵敏度化学发光成像系统 —— 灵动指尖，见你所想

伯乐新一代超高灵敏度化学发光成像系统

—— 灵动指尖，见你所想

【编辑推荐】伯乐生命医学产品最近刚刚推出了一款全新的化学发光数字成像系统，ChemiDoc Touch。我们今天就这款成像系统怎样能帮助研究者轻松拿到感兴趣蛋白图像（甚至超低丰度蛋白），采用什么样的数据进行定量才更合理可靠采访了伯乐生命医学产品的全球产品经理刘宁博士Doctor. Liu。

Western Blot 实验是蛋白相关研究的常规方法之一。随着对蛋白研究的深入，研究方向也从原来较为简单的高丰度蛋白慢慢的转向低丰度蛋白研究。因此，研究的难度越来越大，对检测手段的灵敏度也要求越来越高。实验室中80%的western blot实验是依靠化学发光作为检测手段，但用什么方法进行化学发光检测也决定了研究者是否能看感兴趣蛋白，得到的图像是否能进行准确有效的定量，能不能帮助研究者发现真实的生物学蛋白表达变化。传统的化学发光检测方法主要是压片法，随着近年来冷CCD技术的兴起和成熟，越来越多的实验室开始采用数字成像系统代替了压片的技术。伯乐生命医学产品最近刚刚推出了一款全新的化学发光数字成像系统，ChemiDoc Touch。我们今天就这款成像系统怎样能帮助研究者轻松拿到感兴趣蛋白图像（甚至超低丰度蛋白），采用什么样的数据进行定量才更合理可靠采访了伯乐生命医学产品的全球产品经理刘宁博士Doctor. Liu。

记者：现在研究者们对于低丰度蛋白的研究越来越多，也遇了一些瓶颈，最主要的问题可能还在检测不到感兴趣蛋白信号或者蛋白信号不稳定这些方面。请问您对这些问题有什么样的建议呢？

Doctor Liu：化学发光检测属于现有western blot检测手段中最为灵敏的检测方法学。但是，决定灵敏度能不能最终能检测到感兴趣蛋白取决于western blot流程中的多重方面，包括样品上样量，转印的效率，抗体的滴度和特异性，化学发光底物的灵敏度和检测设备的灵敏度等。有时候改进一个或多个方面就有可能大大提升最终的检测灵敏度。伯乐生命医学产品一直致力于为western blot 流程提供优质的完整解决法案，从样品制备到电泳，从转印到检测。针对超低级丰度蛋白，伯乐能提供不同的蛋白富集方案，例如我们最近推出的Surebeads 蛋白免疫沉淀磁珠就能帮研究人员大大提高对超低丰度蛋白的检测。我们能为不同上样量提供不同的制胶齿梳，为转印提供更有效快速的转印方式，为免疫检测提供高灵敏度的化学发光底物。在不久的将来，我们甚至会推出专用于western blot的检测抗体，这些抗体经12种不同细胞裂解液的内源性蛋白筛选，具有高滴度和高特异性。另外，我们还刚推出全新一代的高灵敏度化学发光成像系统，ChemiDoc Touch。该成像系统能更有效的帮助研究者们检测那些以前只能用压片法才能检测的低丰度蛋白。

记者：伯乐公司之前就推出过一系列广受市场用户好评的成像系统，那么新推出的ChemiDoc Touch 的市场定位是什么呢？

Doctor Liu： 从全球市场看来，差不多有40-50%左右的化学发光实验还采用的是传统压片法。具我们所知，有的实验室会部分实验采用冷CCD成像系统成像，而部分低丰度难检测的蛋白还是会换回压片的方法。从某种角度上讲，压片法的灵敏度和图像锐利度确实不错，但它有很大的局限性，特别是在使用的方便程度和检测的动态线性范围这块有所不足。ChemiDoc Touch的定位就是真正帮助那些采用压片法的研究者们彻底摆脱暗室和繁琐的反复曝光。Touch 采用新一代的创新的镜头和光学组件、超高品质CCD，将数字成像系统的灵敏度和图像质量真正提高至胶片级别，所以实验者不用再担心只能在胶片上才能看到某些极弱条带。事实上，我们在加州大学的Alpha测试中，客户用ChemiDoc Touch检测到了同样条件下用压片法无法检测到的极弱异构体条带，证明Touch甚至比胶片更为灵敏。此外，ChemiDoc Touch 具有比胶片高1000倍的动态范围，能得到更准确的蛋白定量效果。因此，我们有自信Touch能给研究者带来与胶片相媲美的灵敏度和图像质量，更可靠的定量结果和更简单便捷的用户体验。

记者：这款新的成像系统命名为ChemiDoc Touch是因为它是采用的触摸屏设计吗？

Doctor Liu：是的，这款成像系统采用12寸触摸屏交互控制界面，非常的直观。我们希望触摸屏控制软件的设计足够简单，做到即使没有经过特别培训用户也能自行操作。在设计初期，我们将alpha 测试系统放置到不同的压片实验室，不做任何培训让实验者根据他们的使用情况提出建议。他们希望软件界面越简单越好，能有地方让不同的用户看到提醒信息而无需使用便贴条，操作越直观设置越少越好等。基于不同实验室提出的这些建议，我们不断对软件进行了改进，最终有了现在这版ImageLab Touch 软件。登录系统后用户会发现该软件界面非常简洁明了，只需要动动手指缩放成像区域，选择应用和曝光就能得到实验者想要的高质量图像了，操作非常便利。

记者：听上去的确非常的简单。除了操作简便和灵敏度高以外，Touch是否也能帮助研究者解决western blot定量准确性的问题呢？

Doctor Liu：是的。Touch 其实可以从多个方面来保证定量的准确性。首先，就我之前提到了数字成像系统具有比胶片更广的线性动态范围。在检测到低丰度蛋白的同时能更好的保证高丰度蛋白，如那些常被用作为内参的看家蛋白，不会过快产生信号饱和。即使有的蛋白信号真的出现饱和趋势，在Touch上也会有红色提醒显示，避免了将饱和信号带入定量而导致的不准确，这是胶片没有办法做到的。其次，Touch具有自动曝光优化功能，通过软件自动计算出针对目标条带最佳的曝光时间，而压片法只能通过肉眼从多张曝光图像中选择一张觉得效果不错的。但是，是以什么样的指导原则来客观评价胶片图像效果不错？这可能会引入人为变量，导致结果不稳定，重现性不够好等。除此之外，Touch 还整合了伯乐专利免染技术及V3 Western流程，实验者在选择内参的时候除了使用看家蛋白外，还可选择膜上免染总蛋白作为内参来进行归一化定量。这样可以规避因为看家蛋白在一些实验体系中表达不稳定而导致的定量不准确。当然，免染总蛋白的线性检测线性范围也比看家蛋白的化学发光检测范围更广，意味着即使增加上样量也不用担心免染总蛋白的信号会像看家蛋白的化学信号那样容易超出线性检测范围甚至过饱和。

记者：您刚刚提到了V3 western 流程。这是怎样的一个流程，和传统的western流程有什么区别呢？

Doctor Liu：V3 western 流程是在传统的western流程中引入了创新的免染技术。操作过程和传统的western 流程并没有太大的区别但可以大大缩短整个实验的时间。同时，免染技术可以使实验人员在凝胶中和膜上看到全蛋白而无需染色，并且也不会影响免疫检测中的抗体杂交。实验人员在电泳结束后将凝胶放到Touch中进行1分钟激活成像，得到一张类似于考染的图像，从而判定样品的质量和分离效果。这就是我们所说的V3中的第一个V，Visualization。在转印结束后，通过Touch可以在印迹膜上看到膜上免染总蛋白，从而判断转印的效率。这是第二个V，Verify Transfer。第三个V是指Validation，也就是我刚刚提到的采用膜上免染总蛋白作为内参来进行定量归一化。有了这三个V，western流程会更加顺畅，定量结果也会更准确稳定。

记者：谢谢您的讲解。的确，western blot实验是一个复杂的流程，最终结果由多个环节决定，如果能有中间的控制环节，可以让实验人员避免不必要的问题，对实验结果也会更有信心。

Doctor Liu： 是的，每步实验和每个细节都对最终的结果直观重要。伯乐所做的就是一直持续对western blot实验中的每一个环节进行关注和投入，不断完善针对整个流程的服务。