NuPAGE：时候打破旧的电泳误区

一提起蛋白预制胶，大家总是摇头晃脑兼摆手。有人说效果一般，而更多人是嫌价格太高。其实，我想大多数人还是不太了解预制胶，以为和我们自己在实验室中配制的凝胶是一样的。其实，就Life Technologies的NuPAGE凝胶而言，这两者有着天壤之别。NuPAGE，NuPAGE，理所当然是New PAGE啦。

现在，是时候打破旧的电泳误区啦。

蛋白分离误区：

1. 凝胶试剂总是修饰我的蛋白

2. NuPAGE® 凝胶跑得太慢了

3. 预制胶太贵

误区：凝胶试剂总是修饰我的蛋白

事实：NuPAGE® 凝胶试剂实际上保护了您的蛋白

更中性pH是关键

tris-甘氨酸凝胶系统的根本缺点是样品制备过程中的蛋白降解。在使用pH 6.8的tris-甘氨酸样品缓冲液时，样品在缓冲液中加热，因tris-甘氨酸的负温度系数导致pH值下降。这最终导致蛋白水解。

NuPAGE® 凝胶试剂通过维持较高的样品缓冲液pH值，保留了蛋白样品的完整性（图1）。NuPAGE® 样品缓冲液的pH值不会低于pH 8（即使是加热到70°C），因此样品制备过程中蛋白样品不会降解。

图1. 看看NuPAGE® 凝胶的与众不同之处。(A) NuPAGE® 凝胶利用1×MES缓冲液运行。(B) tris-甘氨酸凝胶利用tris-甘氨酸/SDS缓冲液运行。图片显示，与tris-甘氨酸凝胶相比，NuPAGE® 凝胶产生锐利、完整的条带，代表了未水解的蛋白，特别是在第3、5、7、8和9道。

样品上样：(1) Mark12™ 未染色标准品，10 μL；(2) 大鼠肝裂解液，10 μg；(3) 溶菌酶，6 μg；(4) Bio-Rad® 宽范围标准品，1:50稀释；(5) BSA，6 μg；(6) MagicMark™ XP标准品；10 μL；(7)人IgG，6 μg；(8)人IgM，6 μg；(9)大肠杆菌裂解液，10 μg；(10) Novex® Sharp未染色标准品，10 μL。

误区：NuPAGE® 凝胶跑得太慢了

事实：NuPAGE® 凝胶可在250V下跑24分钟

标准运行步骤

为了获得有效的分离，传统Laemmli凝胶需要跑90分钟。相比之下，NuPAGE® 凝胶的标准步骤则为200V，35分钟。此外，如果使用加速步骤，仅需24分钟就能获得有效分离（250V）。

图2. 加快运行时间，而不牺牲性能。NuPAGE® 样品上样：(1) Mark12™ 未染色标准品，10 μL；(2) 大鼠肝裂解液，10 μg；(3) 溶菌酶，6 μg；(4) Bio-Rad® 宽范围标准品，1:50稀释；(5) BSA，6 μg；(6) MagicMark™ XP标准品；10 μL；(7)人IgG，6 μg；(8)人IgM，6 μg；(9)大肠杆菌裂解液，10 μg；(10) Novex® Sharp未染色标准品，10 μL。

误区：预制胶太贵了

事实：使用Novex® 预制胶不仅能节约时间和宝贵的样品，还能节约经费

30多年来传统的凝胶分离基本没变。使用Novex® 预制胶带来以下明显优势：
• 制备时间更短——远离自己灌胶的麻烦，您可以更快获得结果，并进入流程中的下一步
• 实验间的一致性更佳——我们的蛋白凝胶经过严格的质量控制，能最大限度地降低实验间的差异，帮助您获得更加准确的结果

别落伍。拿起Novex® 凝胶，让您的分离工具与时俱进。