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全自动Western blot实验,助您获得更加实验结果

发布: 2013-11-14 21:39:16来源: 赛默飞 AppliedBiosystems

【导语】

之前对Western的优化主要集中在转印,时间缩短,效率提高,但之后的封闭、抗体孵育也颇为繁琐,容易出错。iBind™全自动蛋白印迹处理系统将转印之后的步骤自动化,帮助您获得更佳的实验结果。


对于研究信号通路的实验室而言,Western blot就是家常便饭吧。这个实验,难度并不大,就是步骤多、耗时长,从早忙到晚,有时还要等明天。如今,什么都自动化了。在面包机中加入面粉、牛奶、酵母……,哇,就等着松软的面包新鲜出炉吧。在Western blot中,如果也有这样的“面包机”,那就好了。


Life Technologies真的推出了这样的仪器,那就是iBind™全自动蛋白印迹处理系统。之前对Western的优化主要集中在转印,时间缩短,效率提高,但之后的封闭、抗体孵育也颇为繁琐,容易出错。iBind将转印之后的步骤自动化,帮助您获得更佳的实验结果。

这是如何实现的呢?据介绍,iBind系统不需要外部电源,采用独特的SLF(sequential lateral flow)技术。这种技术通过在iBind™ 卡片上施加机械压力,让一抗和二抗及时释放。iBind™ 卡片中嵌入的玻璃纤维允许抗体和洗涤液以恒定的速度流过印迹膜。这样,您加入试剂后就可以离开,系统自动完成封闭、一抗孵育、二抗孵育和清洗等步骤。


相对于手动操作,iBind带来了更高的灵敏度,更低的背景,且每次实验间的一致性更好。据介绍,自动化处理的CV(变异系数)低于5%,而手动处理高达13%。此外,实验流程也大大缩短,从原来的十几个小时缩短到2.5小时,而设置时间也仅需15分钟。这些步骤完成后,印迹膜即可取出,进行显色。


事实胜于雄辩,下面我们来看看iBind自动处理和手动处理的结果对比。

(A-B)磷酸化Akt的Western blot(从左到右:30 µg–500 ng细胞提取物)。对于iBind处理,500 ng细胞提取物中的磷酸化Akt即可检测,而手动处理时4 µg中的目标才能检测。(C-D)表达CREB的细胞裂解液的Western blot(从左到右:30 µg–1 µg细胞裂解液)。经iBind处理,6 µg细胞裂解液中的CREB即可检测,而手动处理要达到10 µg。


目前,Life Technologies提供iBind™起始套装,内含一台iBind蛋白印迹处理仪、一盒iBind 卡片(10张)和一个iBind溶液试剂盒,让您能立即开始操作。这个卡片和溶液都是耗材,之后还需购买。每张卡片可运行一张迷你的膜。现在新品上市,价格还未知,请咨询Life Technologies。


Life Tech在优酷上发布了iBind系统的操作视频。若您希望自己来试试,也可申请免费试用。即日起至2013年11月30日,填写申请表格,将获得精美水杯一个(限50份)。活动详情请看:www.lifetechnologies.com/ibind 


厂家名称

Life Technologies Corporation (http://www.lifetechnologies.com/home.html) (Nasdaq: LIFE) 是一家致力于改善人类生存环境的全球性生物技术公司。该公司的仪...

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