【平台介绍】ABI3730XL测序平台

美吉生物拥有5台Applied Biosystems公司生产的3730XL测序仪，该型号测序仪测序读长可以到达800到1000bp，单碱基准确性高，应用灵活而广泛。3730XL可同时分析96个样品，该仪器采用4色荧光同时检测，可不间断24h运行，自动灌胶，上样，电泳分离，检测及数据分析。本仪器除了能够完成新基因测序工作或比较测序工作外，还可进行多种片段分析，包括微卫星 DNA 分析，比较基因型分析，单核苷酸多态性（SNP）研究等。

ABI 3730XL测序仪

测序峰图

双脱氧链终止法原理

   双脱氧链终止法又称为Sanger法，其原理是DNA模板在DNA聚合酶、引物、四种脱氧核苷酸三磷酸（dNTP）存在下进行复制时，在四管反应体系中分别按一定的比例引入四种双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3’-OH基团，当ddNTP掺入链的末端时，该链就会停止延伸。如此每管反应体系中就产生了一系列长度不等的以ddNTP为3’端的DNA片段。反应终止后，分4个泳道进行凝胶电泳以分离长短不一的DNA片段，相邻的片段长度相差一个碱基。经放射自显影后，根据片段3’端的双脱氧核苷酸，便可获得合成片段的碱基排列顺序。

ABI3730XL测序仪技术原理

ABI3730XL自动测序仪是基于毛细管电泳和荧光标记技术的DNA测序仪。3730XL测序仪拥有96道毛细管，并用荧光标记代替了Sanger法中的同位素标记，从而大大提高了DNA测序的速度和准确性。4种双脱氧核苷酸（ddNTP）的碱基分别用不同的荧光进行标记，在通过毛细管时，不同长度的DNA片段上的4种荧光基团被激光激发，发出不同颜色的荧光，被CCD检测系统识别，并直接翻译成DNA序列。

仪器特点

1.      双光束双侧激光激发，光栅分光装置和后置超薄CCD检测成像系统。

2.      自动灌胶、上样、电泳分离、检测及数据分析，可连续运行24h无需人工干预。

3.      一次电泳测定96个样品，一天可跑12次测序电泳，每天的测序产率是1152个样品。

4.      自动碱基识别、基因型分析与质量评分判定。

5.      最新POP-7液体分离胶，动态内镀毛细管壁，使读序长度达1000bp以上，精确读序达800bp。

6.      良好的温控装置提供了更大的温控范围（18~70℃），电泳温度可达70℃，有助于去除二级结构的影响。

7.      高灵敏度减少DNA和测序试剂的使用量。

8.      更高的自动化，减少劳力成本及人为失误的成本。

技术应用

1.     菌液、质粒、PCR产物测序

2.     Fosmid/Cosmid/BAC双末端测序

3.     大片段鸟枪法测序

4.     EST测序和分析

5.     步移测序

6.     SNP发现和重测序

7.     STR分型