绿色高效的酶催化反应
持续稳定的pH控制
化学求索之路——化学的未来与挑战,这是《自然·化学》杂质创刊十周年的主题。其中的合成化学被认为是化学中的重中之重,活性天然产物、药物分子、材料分子和农用化学品等都离不开化学合成,那么,未来化学的发展中,如何提升合成方式和合成效率呢?
化学家们从奥妙的生物体中找到灵感:那就是酶!酶催化的特点更加符合现代化社会对于绿色,环保的要求,这是因为酶催化具有:
高效性:酶的催化效率比无机催化剂更高,使得反应速率更快;专一性:一种酶只能催化一种或一类底物,不会破坏其他的活性官能团,有些酶催化后的产物甚至只有单一的构型;温和性:酶催化的化学反应一般是在较温和的条件下进行的,溶剂一般为水、反应温度多数集中在20~40℃。
不过酶催化反应也有不足:由于大多数的酶是蛋白质,对于温度、pH值等条件十分敏感,容易变质导致酶失活,因此酶催化的反应对于温度控制、pH控制精度、灵敏度要求较高。许多酶催化反应最后收率不高、手性ee值偏低,可能都是随着反应进行,体系的pH值发生变化而未及时纠正导致。
解决方案
针对上述问题,梅特勒-托利多提供的解决方案为全自动合成反应器EasyMax搭载多参数仪SevenExcellence。基于EasyMax对温度的精确控制,搭载实时pH模块,配合智能化酸碱液自动加料系统,对反应体系进行实时地pH反馈控制,确保体系pH能够时刻保持在设定值附近,从而确保酶在全反应过程中的催化活性,以便顺利进行评估和优化酶催化反应。
▲ 多参数仪:SevenExcellence
▲ 全自动合成反应器:EasyMax
案例分享:
下面是我们在实验室重现的文献实例,反应路线图如下:
▲ 图1.反应路线图
反应是3,5-二羰基己酸叔丁酯被选择性地还原为(R)-3-羰基-5-羟基己酸叔丁酯。该酶催化反应体系会变得越来越酸,随着反应的进行,体系内pH会不断下降,如果不及时中和掉生成的酸,可能会引起酶的失活,导致反应无法继续进行,或者反应物继续反应,但是生成外消旋产物,这时就需要实时调节pH值。
原文献的实验方案是配制三乙胺/盐酸的缓冲液,使pH稳定在7附近,但是缓冲溶液存在有效缓冲范围,并且大量缓冲溶液和反应体系存在一定的离子效应。
如果采用EasyMax & SevenExcellence组合,可以实现实时pH反馈控制。在全自动加料泵中加入5%的氢氧化钠水溶液,设定目标pH值为6.9,体系开始反应后,pH一旦低于预设值6.9便会根据pH变化速率自动滴加适量的碱,来中和生成的酸。图2可以看到,pH值一直被有效地控制在6.85—6.95之间,保障酶的有效催化活性,酶催化反应的顺利进行。
▲ 图2.反应过程参数变化曲线
在软件中我们还可以调出加料曲线,准确计算仪器为维持体系的pH稳定在反应的各个时刻,加入的碱溶液的量,对工艺进入放大规模生产阶段时,碱的投料量和投料时间,有重要的指导意义。
参考文献:HighlyRegio‐ and Enantioselective Reduction of 3,5‐Dioxocarboxylates[J].Angewandte Chemie, 2000, 112(23).
随着合成分子的日益复杂,酶催化反应也会越来越多地被应用于合成化学中,其专一性和反应条件温和性是最大的优势。正如上述反应,在使用生物酶催化法前,反应要在-60℃下进行,来保证获得的产物是单一构型;而使用酶催化后,虽然产率并没有显著提升,但ee值≥99.5%,且条件温和。
EasyMax & SevenExcellence强强联合,精准控制反应体系的温度和pH稳定,为绿色高效的酶催化反应保驾护航!
会议预告:
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