Cytek多色方案一饱眼福—下篇（三至五激光篇）

Cytek Aurora 和Northern Lights全光谱流式细胞仪系列，正在全世界各地，帮助科学家们用一到五激光进行复杂的多色实验。其独特的光学系统，使得荧光染料的选择范围更为广泛，在贡献更好分辨率的情况下，允许使用更多甚至是峰值光谱高度重叠的荧光染料。一种配置，满足多种实验需求，不仅提供更加丰富的数据信息，并且能够节省实验成本和设置时间，最大限度地减少实验误差，为使用者带来全新的实验体验。

在上篇中，我们已经介绍了1-3激光的多色方案及数据，今天，我们将介绍Cytek光谱流式3-5激光多色方案，及基于这些方案做出的高质量数据，精彩不容错过！

I. 三激光24色免疫细胞检测方案

更加灵活，更多选择，更低成本，轻松设置

Cytek光谱流式独特的光学设计，结合SpectroFlo®软件强大的解析能力，无需更换滤光片，即可实现更多颜色组合的方案设计，灵活方便，同时提供高质量的多参数数据。 基于Cytek三激光配置设计的24色人外周血免疫细胞亚群检测方案，可帮助全面分析T/B淋巴细胞及功能亚群，Treg细胞，B细胞，NK/NKT细胞，单核细胞，粒细胞等信息，方案及结果显示如下。

II. 五激光28色自身免疫性疾病研究方案

在三激光配置的基础上，增加紫外和黄绿激光，新激光器的加入，使总的激光通道数升至64个，赋予了Aurora更高的检测能力，也使基于光谱流式的应用进入了下一个阶段。

选择与OMIP-44相似的细胞标记，设计基于光谱的28色自身免疫性疾病研究方案。将人外周血单个核细胞经过处理，在5激光配置的Aurora上进行获取，方案及结果显示如下。

III. 五激光35色免疫研究方案

光谱流式的优势不仅是可以使用高度重叠的染料，其内置的优化增益设置，无需调节电压和补偿，通过光谱解析，便可以轻松得到高分辨率的分群结果。

针对需要深入探索免疫细胞亚群及功能的研究者，我们基于5激光Aurora设计了一个35色免疫研究方案，该方案目前已被欧美许多研究COVID-19的实验室采纳并使用。方案及结果显示如下。

很长一段时间以来，开发基于荧光素的40 色流式细胞术检测方案，都被认为只是一种空想。许多有着多参数实验需求的研究者只能转向寻找其他替代技术。然而，前不久，Cytek 成功开发了一个40色的免疫分型方案，仅从一根试管中进行细胞获取，便可获得具有出色分辨率的实验结果。

使用OMIQ软件（www.omiq.ai）进行FlowSOM 和 t-SNE-CUDA 分析（双重态，聚集体和死亡细胞被排除在分析之外）。利用FlowSOM 确定了45个细胞群落，如下图所示。

40色方案的t-SNE-CUDA分析 图（用不同颜色代表不同的标记表达）如下图所示，标记是按主要的细胞亚群进行了分组。