两激光可以做超过20色的流式实验吗？

最近，利用两激光配置的Northern Lights光谱流式细胞仪，Cytek开发了一个21色的免疫分型方案！

很长时间以来，在两激光配置的流式细胞仪上，开发基于荧光染料的多色流式实验一直被限制在大约10种颜色。两个主要的原因限制了更多色实验的进一步拓展，一是流式细胞仪的硬件设计，双激光系统一般只配置10个甚至更少的检测器；二是传统的光学设计，即一个检测器对应一个荧光染料。

Cytek® Northern Lights流式细胞仪，两激光(405&488 nm)仪器配置的荧光检测器达到30个，仅用两激光配置即可帮助实验人员从数据中获得更多的信息。最近，Cytek开发了一个两激光21色的人免疫分型方案，仅从一管样本获取，便可获得具有卓越分辨率的数据。

/ 21色方案 /

解冻的人外周血单个核细胞进行样本处理后，进行染色，并在Cytek® Northern Lights 两激光流式细胞仪（405&488nm）上完成获取和数据分析。21色方案所使用的标记（图1），以及21个荧光试剂的光谱重叠（图2）展示如下。

21个荧光素的光谱重叠图是使用Cytek光谱查看器创建的，该查看器可以在Cytek网站上找到，网址是https://spectrum.cytekbio.com。

/ 21色方案的结果展示 /

这个21色方案是Cytek之前开发的24色方案（Cytek Northern Lights 3激光系统）和40色方案（Cytek Auror5激光系统）的一个子集。由于方案是使用解冻的人类PBMC样本进行演示的，所以在方案里还添加了一个24色和40色方案中不存在的死活染料标记。