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Cytek 多色方案一饱眼福--上篇(单/双激光篇)

发布时间: 2020-04-24 03:25 来源:Cytek Biosciences

全光谱流式细胞术的问世,为科学探索带来了更加广泛的可能性,开辟了流式多色研究的新时代。

Cytek Aurora 和Northern Lights全光谱流式细胞仪系列,正在全世界各地,帮助科学家们用一到五激光进行复杂的多色实验。其独特的光学系统,使得荧光染料的选择范围更为广泛,在贡献更好分辨率的情况下,允许使用更多甚至是峰值光谱高度重叠的荧光染料。一种配置,满足多种实验需求,不仅提供更加丰富的数据信息,并且能够节省实验成本和设置时间,最大限度地减少实验误差,为使用者带来全新的实验体验。


基于Northern lights系列,Cytek已经陆续发布了多个基于1-3激光的多色方案及数据,今天,我们就来一饱眼福吧。


I.单激光6色淋巴细胞亚群方案(蓝激光)

Cytek光谱流式的出现,大大提高了单根激光同时检测荧光染料的数量,可最大限度的将商业可用的流式抗体进行配色组合,实现以往不可能实现的多色应用方案。比如淋巴细胞亚群检测,就可实现传统仪器所达不到的激光六色一管检测方案

图1-单激光6色淋巴细胞亚群检测方案及结果举例   

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II.单激光8色T细胞亚群方案(蓝激光)

针对T淋巴细胞亚群中的记忆效应T细胞进行检测,我们设计了一个单激光的8色方案,方案中除了CD4和CD8之外,大多数标记都存在高度共表达现象,但通过光谱流式进行检测,可以将我们关注的细胞群很好的进行区分。

图2-单激光8色记忆效应T细胞的检测方案及结果举例

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III.单激光9色T/单核细胞亚群方案(蓝激光)

选择冻存的人外周血单个核细胞样本,经处理后,在Cytek单激光(蓝激光)14通道配置的光谱流式细胞仪上进行获取分析,方案及结果显示如下。这个九色方案中,增加了单核细胞标记CD14,通过检测可以很清晰的对CD4+ T细胞和CD8+ T细胞亚群,以及单核细胞进行识别。

图3-单激光9色免疫细胞亚群检测方案及结果举例

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IV.单激光10色T/单核细胞亚群方案 (紫激光)

与九色方案类似,十色方案增加了T细胞受体标记及HLA-DR,对于有不同检测需求的用户可以选择此方案。用人外周血单个核细胞样本,经处理后,在Cytek紫激光16通道配置的光谱流式细胞仪上进行获取分析,方案及结果显示如下。

图4-单激光10色T细胞亚群检测方案及结果举例

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V. 两激光14色免疫细胞亚群方案(蓝+红激光)

在九色方案基础上,加入了B细胞,树突状细胞状细胞相关标记,进一步区分T淋巴细胞,B淋巴细胞,单核及树突状细胞亚群。用人外周血样本,经处理后,在Cytek两激光(蓝+红)22通道配置的光谱流式细胞仪上进行获取分析,方案及结果显示如下。

图5-两激光14色免疫细胞亚群检测方案及结果举例

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VI.两激光21色免疫细胞亚群方案(蓝+紫激光)

Cytek最近开发可以一个基于两激光(蓝+紫激光)系统的21色免疫细胞亚群方案,纳入更多检测指标,进一步区分T/B淋巴细胞及记忆效应亚群,Treg细胞,B细胞,NK/NKT细胞,DC细胞等亚群。

这个两激光21色方案是Cytek之前开发的24色方案(Cytek 3激光系统)和40色方案(Cytek 5激光系统)的一个子集。使用解冻的人类PBMC样本进行演示,方案中还添加死活染料标记,方案及结果显示如下。

图6-两激光21色免疫细胞亚群检测方案及结果举例

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