TMT/iTRAQ定量蛋白质组表达谱分析

• 服务简介

  
  

  iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和TMT(Tandem Mass Tags)技术是分别由美国AB Sciex公司和Thermo公司研发的多肽体外标记定量技术。此类技术最多可采用11种稳定同位素标签，通过特异性标记多肽的氨基基团，然后进行串联质谱分析，可同时比较多达10种不同样本中蛋白质的相对含量。

  
  

• 技术原理

  
  

  
  

  iTRAQ/TMT试剂由三部分组成：报告基团、平衡基团和反应基团。反应基团形成2-10种等质量同位素标签。iTRAQ/TMT试剂标记酶解后的肽段，可与氨基酸N端及侧链的伯胺基团发生反应。在一级谱图中，来自于不同样本的同一肽段，标记后表现为相同的质荷比。在二级谱图中，报告基团、平衡基团和反应基团之间的键断裂，带不同同位素标签的同一肽段产生质量不同的报告离子，根据报告离子的丰度可获得样本间相同肽段的定量信息，再经过软件处理得到蛋白质的定量信息。其基本原理与技术流程如下图所示：

  
  

  

  
  

  
  

• 仪器设备

  
  

  Thermo Scientific Q Exactive HF-X
  

  Thermo Scientific Orbitrap Fusion Lumos

  Thermo Scientific Q Exactive Plus

  Thermo Scientific Orbitrap Fusion

  Thermo Scientific Q Exactive

  
  

  
  

• 技术优势

  
  

        平行比较2-10个样本

        蛋白通量高，覆盖度高

        可用于各种类型生物样本

  
  

  
  

• 应用领域

  
  

  
  

        各种胁迫、生理、病理条件下细胞、组织样品中高通量蛋白表达谱分析

        各种物种的蛋白质组草图的构建

  
  

  
  

• 参考文献

  
  

  
  

  [1] Yang QS, Wu JH, et al. Quantitative proteomic analysis reveals that antioxidation mechanisms contribute to cold tolerance in plantain (Musa paradisiacal L.; ABB Group) seedlings. Mol Cell Proteomics. 2012; 11(12): 1853-69.

  [2] Leivonen SK, Rokka A, et al. Identification of miR-193b targets in breast cancer cell and systems biological analysis of their functional impact. Mol Cell Proteomics.2011; 10(7).

  [3] Xu C, Gao X, et al. The basal level ethylene response is important to the wall and endomembrane structure in the hypocotyl cells of etiolated arabidopsis seedlings. Mol Cell Proteomics. 2012; 54(7): 434-55.

  
  

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