双特异性抗体(Bispecific Antibody)是可以特异性结合两种抗原或两个表位的抗体分子,他们的双位点能力为其提供了更多的治疗潜力。目前全球范围内双抗开发正呈现如火如荼的态势,双抗药物也已进入高速发展的阶段。然而,在其重组生产过程中,尤其是含Fc片段的IgG-like双抗分子,存在重链轻链错配、缺失以及聚集等问题(图1),这为双抗药物的下游生产与纯化提出了挑战,而选择合适的层析介质与平台方法将会带来事半功倍的效果。
图1 双抗重组表达过程中可能产生的副产物类型【1】
图2 Capto MMC ImpRes配基与目标分子间的多种相互作用
去除聚集体
图3 Capto MMC ImpRes层析图谱(A-NaCl线性洗脱,B-精氨酸线性洗脱)
去除错配和缺失等副产物
案例一:Half antibody的去除
图4 Capto MMC ImpRes分离Half antibody
案例二:Homodimer的去除
图5 Capto MMC ImpRes去除Homodimer的条件、层析图谱以及检测结果
案例三:LC-missing副产物的去除
图6 WuXiBody纯化中Capto MMC ImpRes去除LC-missing 副产物
去除工艺相关杂质
图7 Capto MMC ImpRes去除工艺相关杂质
扫码即刻下载《双抗的纯化策略》解决方案
参考文献:
【1】 双抗的纯化策略, Cytiva
【2】 Capto MMC ImpRes Data File, Cytiva
【3】 Polishing of monoclonal antibodies using Capto MMC ImpRes in bind and elute mode, Cytiva
【4】 Zhang X, Chen T, Li Y. A parallel demonstration of different resins'' antibody aggregate removing capability by a case study. Protein Expr Purif. 2019 Jan;153:59-69.
【5】 Tang J, Zhang X, Chen T, Wang Y, Li Y. Removal of half antibody, hole-hole homodimer and aggregates during bispecific antibody purification using MMC ImpRes mixed-mode chromatography. Protein Expr Purif. 2020 Mar;167:105529.
【6】 Wan, Y. , Zhang, T. , Wang, Y. , Wang, Y. , & Li, Y. Removing light chain-missing byproducts and aggregates by capto mmc impres mixed-mode chromatography during the purification of two wuxibody-based bispecific antibodies. Protein Expression and Purification, 175.
【7】 Wan Y, Wang Y, Zhang T, Zhang S, Wang Y, Li Y. Application of pH-salt dual gradient elution in purifying a WuXiBody-based bispecific antibody by MMC ImpRes mixed-mode chromatography. Protein expression and purification. 2021;181:105822.
声明:本文为作者原创首发,严禁私自转发或抄袭,如需转载请联系并注明转载来源,否则将追究法律责任
点击至
中文官网
扫码关注
官方视频号
点击拨打
客服热线