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FAIMS Pro全新升级---FAIMS Pro Duo

发布时间: 2021-07-06 15:29 来源:赛默飞色谱与质谱分析

FAIMS Pro

相信很多老师对于赛默飞的FAIMS Pro(High-field asymmetric waveform ion mobility spectrometry,高场非对称波形离子迁移谱)接口已经非常熟悉和了解了。FAIMS Pro(图一)是一种在大气压条件下分离离子的技术,安装在大气压离子源与MS真空腔的入口之间,通过电极上的补偿电压除去蛋白质组学样品中一价离子对检测带来的干扰,降低背景噪音,从而扩大蛋白鉴定的深度

图1 Exploris 480 质谱仪 配置FAIMS Pro 和Easy nLC 1200(点击查看大图)

FAIMS Pro接口一经推出,就收到了广泛好评。从 2018 年下半年发布以来,已发表了 47 篇同行评议的文章,覆盖 19 个不同的研究应用领域,包括肽段、蛋白和蛋白复合物分析,集中在发现/表征和非标定量(LFQ)及标记定量(TMT)等相关的应用(图二)

图2 FAIMS Pro 发表文章汇总

(点击查看大图)

 

今天我们要隆重介绍的是全新一代的FAIMS接口,FAIMS Pro Duo。那么接下来让我们看看FAIMS Pro Duo都有哪些新表现。

 

增强选择性,超高灵活性

 

为了满足分析各个实验室与日俱增的对复杂样品,不同种类化合物的定性和定量需求,FAIMS Pro Duo在保留前一代对多肽蛋白类化合物分析性能的基础上增加了对于小分子化合物的分析定量能力,使FAIMS Pro Duo的应用场景不单局限于蛋白质组学样品分析,更可以应用到常规定量分析

 

FAIMS Pro Duo相比较于前一代FAIMS Pro 保留了之前所有的低流速性能,并扩展支持高流速应用,最大适用流速达到了1mL/min。其采用优化的的圆柱形几何形状,大大增加了离子传输到质谱仪的概率,缩短了停留时间,同时允许每个数据采集方法进行多个 CV 设置。拆装速度快,不需要破坏真空,组装仅需两分钟,单向wan美对齐,无需微调,不需要使用标准品进行校正(图三)。

图3 FAIMS Pro Duo 内部结构

(点击查看大图)

升级之后的FAIMS Pro Duo不仅可以搭载在蛋白质组学常用的质谱平台Exploris240,480,三合一质谱Eclipse以及Fusion Lumos上。FAIMS Pro Duo也可以搭载到Exploris 120,以及三重四极杆平台TSQ Altis和Quantis上,更方便于常规流速下的定量分析(图四)。

图4 FAIMS Pro Duo 可适用的应用及LC-MS系统

(点击查看大图)

 

CV优化,降低噪音,助力靶向定量

 

由于不同的价态或者分子量的化合物其最优条件下的CV都各有差异。所以针对于定量实验,FAIMS Pro Duo 增加了CV优化的功能。不管是使用直接进样或者是在线的色谱分离方法都可以直接对一种或者多种化合物进行调谐和CV优化(图五),大大简化了FAIMS Pro Duo接口与 Thermo Scientific质谱仪的设置和使用,缩短方法开发的时间。

图5 色谱分离的方法优化CV值

(点击查看大图)

FAIMS Pro Duo去除基质干扰的能力在化合物定量下限浓度附近表现更为明显(图六)。当化合物浓度接近定量限时,如果目标化合物出峰附近有基质干扰峰,这时基质干扰峰会影响目标化合物的检测,出现色谱峰信噪比低,积峰困难等情况。我们可以通过使用FAIMS Pro Duo的自动CV优化功能,对目标化合物的CV电压进行优化,用FAIMS Pro Duo去除掉部分的杂质离子,从而提升目标化合物的信噪比,进一步降低定量LOQ。

图6 FAIMS Pro Duo可以增加LOQ的信噪比,降低定量下限(点击查看大图)

以上就是FAIMS Pro Duo的新特性,它在保留了前一代FAIMS Pro在蛋白质组学里去除杂质干扰,扩大蛋白鉴定深度上的良好表现,进一步增加了它在定量分析上的适用性。最重要的是它还支持从FAIMS Pro的现场升级,感兴趣的老师快来联系我们吧!

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