赛默飞全能型Orbitrap Eclipse三合一质谱仪

全能型Orbitrap Eclipse™ 三合一质谱仪

自2013年推出第一代三合一Orbitrap Fusion质谱仪开始，该系列完美整合了四极杆、离子阱和Orbitrap质量分析器的多功能性和可用性，具有超高分辨率、灵敏度、稳定的高质量精度，以及多项可延展性。图1展示了Orbitrap三合一质谱不断革新的进化史。

图1 Orbitrap三合一系列质谱的进化史

最新型的三合一质谱仪Orbitrap Eclipse™ 平台带来了多项创新，显著改善了质谱数据的深度和质量，特别适用于蛋白组学中对全蛋白质组定量的准确度、高通量需求，生物制药中复杂蛋白或小分子结合的生物药表征，解析蛋白质高级结构等应用难题，真正做到性能比尖，通用万间实验室。

Orbitrap Eclipse™ 三合一质谱仪

核心功能升级

Core function upgrade

为了应对蛋白质组学、生物制药以及蛋白质高级结构分析中不断出现的新的挑战，Orbitrap Eclipse™的核心功能进行了升级（图2），包括新的QR5分段四极杆质量过滤器带来的主动离子管控技术（AIM+），实时检索（Real-time search），深度真空技术（Ultra-high vacuum manifold），选配的质子转移电荷减少（PTCR）技术和选配的高质量范围MSⁿ（HMRⁿ）模式等，助力研究工作持续升级。

图2 Orbitrap Eclipse™三合一质谱仪结构示意图

Orbitrap Eclipse™性能指标

无与伦比的分析性能及通用性

●QR5分段式四极杆：出色的母离子选择性和灵敏度

●实时检索：为TMT分析提供前所未有的深度和准确度

●高质量范围MSⁿ(HMRⁿ)，选配：满足复杂天然蛋白复合体的全面分析

●质子转移电荷减少(PTCR)技术，选配：简化复杂的自上而下(top-down)谱图数据

●多种可选功能：带来前所未有的多功能，满足不同应用需求 IC| ETD | UVPD |1M | HMRⁿ | PTCR | FAIMS Pro interface

●通用型接口与界面：与Orbitrap Exploris 480以及TSQ质谱通用，带来良好的易用性

全能型Orbitrap Eclipse™三合一质谱仪轻松应对生物学研究中的各项挑战

图3 生物学研究中的各种挑战

面对复杂的生物学研究，全能型Orbitrap Eclipse™通过自身的各种武功秘笈，均能帮助科研人员轻松过招。

Solution ：QR5分段式双曲面四极杆，提升灵敏度和特异性

图4 QR5分段式双曲面四极杆可有效提升蛋白和肽段鉴定数目

Solution 2：Real-Time Search实时检索

TMT标记定量中，如果使用MS²方法进行定量，由于共流出肽段的干扰存在比值压缩效应，影响定量准确性。而使用MS³方法可以有效提高定量准确性，但即使是使用SPS-MS³方法，与MS²方法的定量肽段数目相比仍有些差距。

究其原因，一部分是因为OT MS³需要时间更长，另一部分是因为只有40-50%的MS²谱图可得到鉴定。而无法得到鉴定的50-60% MS²谱图对应的OT MS³谱图其实是浪费了采集时间。

图5 实时检索 SPS MS³的原理示意图及与SPS MS³的对比

实时检索（Real-Time Search）通过在流程中加入实时数据库快速检索，确定哪些MS²谱图可得到鉴定，并决定是否进行MS³采集（图5）。Eclipse中内置方法模板（图6），单击即可设置，其采用Comet搜索引擎（与SEQUEST类似），可使用任意数据库，最多3个任意修饰，并可调整pass/fail阈值。

图6 实时检索数据采集流程

实时检索方法可显著提高定量肽段数目和通量（图7），并进一步提高SPS-MS³的定量准确性（图8）。

图8 实时检索提高TMT SPS-MS³定量准确性

Solution ：深度真空技术，选配的HMRⁿ（高质量范围MSⁿ），选配的PTCR（质子转移电荷减少）技术

01．深度真空技术

全新设计的真空装置可提供深度真空，且扩大了IRM中气压可调范围（0.5-20mTorr），可为完整蛋白的分析提供更高的灵敏度（图9）。

图9 深度真空可有效提高完整蛋白的灵敏度

02．HMRⁿ（高质量范围MSⁿ），选配

Eclipse中选配的HMRⁿ将Orbitrap质量范围扩展到8000m/z，成为第一台既有MSⁿ又有高质量范围的Orbitrap。

在蛋白高级结构分析中，尤其是蛋白质与小分子结合的分析，需要同时分析蛋白质与小分子，HMRⁿ结合多种碎裂方式可同时确定蛋白质结构以及与其结合的小分子（图10）。

图10 HMRⁿ与多种碎裂方式帮助非共价结合的膜蛋白与小分子脂质的同时解析

03．PTCR（质子转移电荷减少）技术，选配

由于质谱得到的为m/z的值，如果要得到mass，就必须要确定电荷数，如何在不确定电荷的情况下计算mass呢？现在使用Eclipse中独有的PTCR技术，可帮助测定电荷数目。

图11 PTCR原理

PTCR技术中通过气相的离子-离子相互作用，将蛋白质带有的质子转移给特定的化合物（C₁₄F₂₄）离子，从而造成蛋白质本身电荷减少（图11），得到一系列的电荷减少离子。通过相邻价态离子间的间距即可测定蛋白质的电荷数目。

在复杂蛋白质混合物中，由于共流出的存在，很难进行谱图的解卷积以及确定DDA MS²的母离子。在使用PTCR技术后，质谱图更容易解析，可从复杂混合物中解析到更多的蛋白质（图12）。

图12 PTCR技术帮助简化复杂的蛋白质谱图

此外，PTCR可通过降低母离子和/或子离子的价态，帮助解析复杂的MS及MSⁿ谱图，可检测到更多的母离子及碎片，对结构生物学以及生物制药的应用大有助益。

Orbitrap Eclipse™整合了深度真空技术，HMRⁿ以及PTCR技术，使其成为完整蛋白或top-down分析的利器。

全能型Orbitrap Eclipse三合一质谱仪的创新得益于赛默飞与行业领先者的深度合作，不断聆听用户的需求，完善自身，也得到了用户的积极肯定。

赛默飞全能型Orbitrap Eclipse三合一质谱仪信息由赛默飞色谱与质谱分析为您提供，如您想了解更多关于赛默飞全能型Orbitrap Eclipse三合一质谱仪报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途