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单克隆抗体制备/蛋白表达纯化

参考报价: 面议 型号: 单克隆抗体制备/多克隆抗体制备/蛋白表达纯化
品牌: 威斯腾 产地: 重庆
关注度: 30 信息完整度:
样本: 典型用户: 暂无
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单克隆抗体制备/多克隆抗体制备/蛋白表达纯化


单克隆抗体制备

单克隆抗体(单抗)应用淋巴细胞杂交瘤技术将免疫动物的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,通过HAT筛选,ELISA抗体检测,有限稀释克隆化,选择出具有分泌抗体功能又能无限繁殖的来源于单一B细胞的杂交瘤细胞,并产生抗体,就是单克隆抗体。单抗的最大优势是它的特异性、均一性、高效性和无限供应性。在免疫学、医学、生物学等领域的基础研究和临床医学上,包括对疾病(包括癌症)的诊断、预防和治疗等方面,均显示出巨大的生命力。

实验步骤:

1. 每种抗原免疫5只Balb/c小鼠
2. 选取ELISA效价较高的小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合
3. 进行2~4次克隆化及ELISA筛选,确保杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性
4. 抗体亚类鉴定
5. 至少选择2株杂交瘤细胞的冻存,并免费提供一年的保种服务

抗体的应用:制备的抗体可能用于ELISA、WB、IHC、IP等实验。

客户需提供的材料及信息:

  • 客户需要提供2mg以上的纯化蛋白质,纯度≥90%(SDS-PAGE检测),若带融合标签需说明并提供筛选蛋白

  • 如为多肽,客户要提供两种偶联不同蛋白质的多肽各4mg,未偶联多肽1mg,偶联多肽纯度≥85%

结果提供:

实验报告                   

免疫前血清(20μl)         

免疫后血清(20μl)

抗体上清(至少3株,1ml/株)   

杂交瘤细胞(3株)           

抗体亚型

如需要纯化的客户增加如下结果:

纯化抗体(3株)(纯度≥90%,浓度≥1mg/ml,每株5mg)   免疫效价   抗体亲和力常数

相关说明:

A、免疫原可以为重组蛋白、天然蛋白、合成多肽、偶联小分子等。

B、客户需要承诺外的细胞株,每株价格为500元。

C、客户需要对承诺外的细胞株抗体进行纯化,价格为1500元/5mg(单独报价为1800元)。

D、如客户需要非IgG类的其他细胞株,每株价格500元,纯化费用500元/5mg(CAAS法纯化)


多克隆抗体制备

多克隆抗体存在于免疫动物的血清中,可通过直接分离血清获得。由于具有可识别多个表位、可引起凝集反应、沉淀反应等优点,被广泛应用于免疫学诊断领域。比如经常用到的Western blotting实验中的酶标二抗和ELISA实验中的包被抗体。而且制备费用也较单克隆抗体低。
我中心专业从事抗体生产和定制服务,您提供抗原,我们提供给您满意的抗体产品;如果您只有半抗原,那么我们可以为您提供KLH或BSA的交联服务,提高免疫应答水平,获得高效价的抗体产品。

服务特色:
稳定的生产管理系统,保证成功率。如果最后没有达到承诺的效价,不收取任何项目费用。如果为多肽项目,可以免费为客户做序列分析及多肽选取。

应用:
制备的抗体可能用于ELISA、WB等实验。

客户需提供的材料及信息

1、客户需要提供2mg以上的纯化蛋白质,纯度≥90%(SDS-PAGE检测),若带融合标签需说明并提供筛选蛋白。

2、如为多肽,客户要提供两种偶联不同蛋白质的多肽各4mg,未偶联多肽1mg,偶联多肽纯度≥85%。


蛋白表达纯化

随着蛋白药物市场的快速发展和蛋白质组学研究的深入,高纯度活性蛋白的需求越来越大。威斯腾生物中心组建了一支由多名具深厚生物技术基础与制药企业工作经验的留学归国人员和国内专家为核心的团队。可为国内外客户提供从基因到蛋白纯化的整套技术服务。

威斯腾服务特色

稳定而多样的表达系统:威斯腾生物已建立整套的基因克隆与表达体系,无论是单个基因的克隆、表达与纯化,还是多个基因高通量的基因克隆、表达和纯化,均能选用适合您试验(科研项目)需要的表达系统和合适的表达载体为您提供优质的服务。

多种纯化方式:可为客户提供多种蛋白纯化服务,纯化方式包括亲和层析纯化、凝胶过滤、离子交换、疏水层析等,客户可根据需要选择合适的纯化方式。

专业的团队和良好的信息管理体系:专业的基因克隆、蛋白表达与纯化技术人员与团队,具有丰富的表达和纯化经验,可为客户解决各种瓶颈问题, 良好信息管理体系使我们能够为客户提供成熟、高效的基因克隆服务。

操作流程

大肠杆菌和酵母蛋白表达系统:

合成基因(另外收费)或者客户提供

SDS-PAGE检测表达

Western blot检测表达(可选)模板(cDNA、基因组DNA、质粒等)

构建表达载体

筛选阳性克隆

表达优化和可溶性分析

提供结果

1、构建的表达载体及测序报告

2、SDS-PAGE结果

3、筛选的表达菌株

4、Western blot结果

5、实验流程及结果

6、2ml 1.0×108pfu/ml的病毒(利用昆虫杆状病毒蛋白表达系统表达时)


稳定表达细胞株(哺乳动物细胞)


威斯腾实验服务流程


 

威斯腾生物服务项目

分子生物学检测 蛋白质与免疫学 动物实验
实时荧光定量PCR 单克隆抗体制备 帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP) 多克隆抗体制备 抑郁症动物模型
ELISA(酶联免疫吸附法)技术 Western-blot 实验服务 脊髓损伤模型
生化指标检测 蛋白双向电泳实验服务 脑外损伤模型
双荧光素酶报告基因检测 原核蛋白表达纯化 骨神经损伤模型
染色质免疫共沉淀(ChIP) 真核蛋白表达纯化 心肌缺血模型
GST pull Down ITRAQ定量蛋白质组学 心力衰竭模型
SILAC蛋白组学 肺动脉高血压动物模型
高血压模型
病毒包装 实验课题整体外包 粥样动脉硬化模型
过表达/干扰慢病毒包装纯化 整体课题外包 大脑中动脉阻塞模型
过表达/干扰腺病毒包装纯化 细胞整体实验外包 慢性之气管炎模型
逆转录病毒包装纯化 动物整体实验外包 过敏性哮喘模型
腺相关病毒包装纯化 肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片 原代细胞培养 肝纤维化模型
细胞因子芯片 骨髓间充质干细胞培养 胆结石模型
BioPlex悬浮芯片 脂肪干细胞培养 急性胰腺炎模型
生长因子芯片 心肌成纤维细胞培养 急性肾衰竭模型
炎症因子芯片 软骨细胞培养 体内血栓模型
血管生成因子芯片 血管内皮细胞培养 关节炎模型
凋亡因子芯片 神经元细胞培养 I型和II型糖尿病模型
趋化因子芯片 内皮组细胞原代培养 裸鼠成瘤
HuProt TM 20K人类蛋白组芯片 基因编辑动物
电生理相关服务 动物整体实验服务
膜片钳实验
细胞生物学检测 高通量测序 代谢组学
细胞原代培养 mRNA测序 气相色谱GC/MS
MTT检测 LncRNA测序 液相色谱LC/MS
细胞凋亡检测 全基因组测序 核磁共震NMR
细胞周期检测 RNA-Seq测序
细胞克隆形成实验 外显子测序 影像学相关实验
Transwell细胞迁移/侵袭 16s扩增子测序 Micro-CT
流式分选 Small RNA测序 小动物活体成像
CCK8/XTT检测 宏基因组测序 核磁共振
台盼蓝检测细胞活性 单细胞测序 PET-CT
药物筛选细胞学实验 circleRNA测序
细胞粘附性检测 甲基化测序 基因编辑动物
细胞划痕实验 条件性敲除小鼠/大鼠
细胞生物学整体实验 全基因敲除小鼠/大鼠
细胞成管实验
病理检测 CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入 基因芯片
扫描电镜 基因定点突变细胞系 LncRNA芯片
透射电镜 单基因敲除细胞系 miRNA芯片
HE染色 多基因敲除细胞系 mRNA芯片
免疫组化 目的基因敲入细胞系 甲基化芯片(限人和小鼠来源样本)
Tunel(原位末端凋亡法)检测 报告基因敲入细胞系 SNP芯片(限人和小鼠来源样本)
激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除细胞系
免疫荧光
Masson染色 CRISPR/Cas9动物敲除/敲入 科研设计指导&文章评估/润色
原位杂交 基因敲除大鼠/小鼠 科研文献论著翻译
荧光原位杂交 基因敲入大鼠/小鼠 论文翻译润色服务
特殊染色(PSA、茜素红、阿尔新蓝等) 临床实验/科研实验设计方案指导
行为学检测 药物筛选服务项目 药效学评价
旷场实验 高通量自动药物筛选平台 抗肿瘤药物药效学评价
重复性刻板行为检测 细胞高内涵药物筛选平台 心血管系统药物药效学评价
动物跑台检测 蛋白质组学靶标研发平台 泌尿系统药物药效学评价
强迫游泳 分子药理研究平台 内分泌系统药物药效学评价
生物膜片钳药物筛选平台 抗炎免疫药物药效学评价
常规药物体外筛选


【本平台合作项目】
 

分子生物学、细胞生物学、病理染色检测、细胞敲除&敲入、模式与转基因动物、SPF动物保种、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、SiRNA与纳米载药、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务!



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