过表达慢病毒

过表达慢病毒

目前很多课题研究都会使用到慢病毒载体，通过针对目的基因构建过表达慢病毒，转染到目的细胞或者动物体内，研究其目的基因上调对细胞或者动物某种通路或者疾病的影响。

一、实验操作步骤：

1. 根据目的基因相关信息（注：客户提供基因ID或者基因序列）获取目的基因；

2. 选择符合实验要求的载体；

3. 将目的基因构建到慢病毒载体获得含有目的基因的重组载体；

4. 对于测序正确的重组质粒，提取和纯化高质量（不含内毒素）的重组质粒；

5. 使用高效重组载体和慢病毒包装质粒共转染293T 细胞，进行病毒包装并收集上清液；

6. 通过超滤和超速离心浓缩和纯化病毒；

7. 使用病毒液感染293T细胞，测定病毒滴度。

二、客户须知

1. 提供与本实验相关的详细资料（含课题基本情况及预期达到的目的等）；

2. 提供目的基因RefSeq ID；

3. 目的基因的表达克隆及相关信息；

4. 目的基因抗体及抗体使用说明书（如委托本中心的实验中涉及Western Blot实验）；

5. 目的细胞及相关说明（如委托本中心的实验中涉及目的细胞的培养）。

三、结果提供

1. 目的基因慢病毒质粒测序文件,测序图谱,质粒结构图,序列比对文件；

2. 目的基因慢病毒质粒构建、包装、纯化实验报告；

3. 1ml过表达病毒，并赠送阴性对照（病毒滴度 ≥1 X 10⁸ TU/ml），同时提供病毒滴度检测报告；

4. 功能检测的相关实验报告。

注：报告未能详尽的实验相关数据，本中心在能力范围内予以补充。 

慢病毒、腺病毒、逆转录病毒载体系统之间的比较

四、服务周期

2-3个月

威斯腾实验服务流程

威斯腾生物服务项目

【本平台合作项目】 

分子生物学、细胞生物学、病理染色检测、细胞敲除&敲入、模式与转基因动物、SPF动物保种、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、SiRNA与纳米载药、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务！

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途