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诱导性条件性点突变小鼠模型
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品牌: 威斯腾 产地: 重庆
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诱导性条件性点突变小鼠模型

一、诱导性条件性点突变小鼠模型:

指在诱导剂的作用下,点突变能在特定的时间点被引入特定细胞或组织中目的基因位置的动物模型。诱导前表达野生型蛋白;诱导后,突变的蛋白在全身所有特定的细胞或组织中表达。 


二、优势与不足:

优势:能避免常规点突变导致的致死表型(胚胎干细胞致死、嵌合鼠致死或F1代杂合子小鼠致死),使模型小鼠能够正常生长发育,在实验需要的发育时期给予诱导剂,小鼠表达突变蛋白。

不足:设计点突变策略时必须保证突变基因的表达水平及表达谱与野生基因的表达一致。


三、诱导性条件性点突变小鼠模型原理:

诱导性的条件性基因敲除系统是基于细胞核激素受体与相应的激素配体结合后,细胞核激素受体将由细胞浆转位到细胞核发挥其基因表达调控作用。雌激素受体(ER)就是这样一种细胞核激素受体,它能结合雌激素,同时能结合雌激素的拮抗剂-他莫西芬。当ER处于失活状态时,它在胞浆中与热休克蛋白90(Hsp90)结合,不能进入细胞核;但当胞浆中存在雌激素或他莫西芬时,ER与Hsp90分离,同时与雌激素或他莫西芬结合,并能够进入细胞核。利用ER的这一作用特点,将Cre重组酶与ER融合,当胞浆中没有雌激素或他莫西芬时, CreER融合蛋白就会与Hsp90结合,CreER融合蛋白不能进入细胞核,从而将Cre重组酶滞留在胞浆;当胞浆中存在雌激素或他莫西芬时,CreER融合蛋白与Hsp90分离,并与雌激素或他莫西芬结合,从而能够进入细胞核。在细胞核中,Cre重组酶识别目的基因中的两个loxP位点并发挥其重组活性,获得基因敲除动物模型。在动物模型制备的应用中,为了消除内源性雌激素的影响,研究者将雌激素受体的配体结合区进行突变,从而使其不能与体内的生理性雌激素结合,而只能与外源性的雌激素类似物-他莫西芬结合,这样就消除了内源性雌激素所造成的非特异性基因敲除,保证了Cre的表达受他莫西芬的给药时间控制,目前常用的雌激素受体融合蛋白为CreERT2。同时Cre的表达受组织特异性启动子的调控,从而使Cre能在特定的组织或细胞表达。


四、诱导性条件性点突变小鼠模型应用:

1、致死性目的基因的研究;

2、目的基因在发育或年龄相关疾病方面的研究;

3、药物的靶标确认;

4、药物的临床前评价。


威斯腾实验服务流程


 

本平台可制备的动物模型(部分)

疾病方法动物模型成功率操作难度耗时程度
帕金森疾病6-OHDA脑立体定位注射Rat70%~80%简单比较耗时
MPTP、IP或SC注射(急性or慢性)Mouse70%简单快速
抑郁症禁食、禁水、夹尾、冰水等慢性不可知刺激Rat80%简单非常耗时
利血平药物注射或者悬尾和强迫游泳Mouse60%简单非常耗时
脊髓损伤脊髓半切、全断、牵张、挤压、打击等Rat80%普通非常耗时
脑外损伤颅脑损伤仪打击致损Rat80%普通比较耗时
坐骨神经损伤
(周围神经损伤)
切断或者夹闭神经(手术)Rat90%简单一般
心肌缺血心脏冠状动脉左前降支结扎Rat60%~70%较难非常耗时
心力衰竭腹主动脉缩窄手术致心力衰竭Rat90%简单快速
肺动脉高压手术分流术和MCT IP或SC注射Rat80%普通一般
高血压单肾单夹肾血管或者两肾一夹型肾血管Rat80%简单快速
粥样动脉硬化高脂饮食+VD3喂养Rat/Mouse50%简单非常耗时
大脑中动脉阻塞(MCAO)线栓法制备Rat 70%普通比较耗时
慢性支气管炎烟熏Rat80%简单耗时
过敏性哮喘OVA+氢氧化铝致敏Rat/Mouse80%普通耗时
肺炎模型鲍曼不动杆菌气道滴注Rat/Mouse90%简单快速
肝炎—肝硬化—肝癌DEN诱导Rat80%简单比较耗时
肝纤维化CCL4诱导Rat80%简单耗时
胆结石模型喂养致石饲料Mouse90%简单一般
急性胰腺炎牛黄胆酸钠胰胆管注射Rat90%普通快速
急性肾衰竭顺铂尾静脉注射/肾动脉缺血Rat80%普通一般
体内血栓手术或者药物诱导Mouse60-70%普通比较耗时
关节炎模型Ⅱ型胶原+佐剂诱导Rat/Mouse90%简单一般
Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病STZ或增加高脂饲料喂养药物诱导Rat/Mouse80%简单比较耗时
荷瘤鼠/裸鼠成瘤皮下成瘤BALB/cA-nu mice90%简单一般
更多动物模型敬请咨询


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