慢病毒应用于在体注射

慢病毒应用于在体注射——不同系统

由于更能模拟人类的生理和病理条件，所以在科研上，动物实验获得的结果，比体外实验更具有说服力。在某个通路或某种疾病的研究中，通常会人为地将外源基因用病毒载体注入动物组织，检测其对其他基因和通路、组织器官、动物行为等的影响。但这类动物实验条件的摸索和优化，是一个难点。如何选择注射的部位、选择何种病毒、注射多少体积、以及注射后什么时间去检测等实验条件都需要摸索。慢病毒因其可以稳定表达的特性，常用于体内外实验。以下我们将展示慢病毒应用于不同系统注射时的注射参数，以便为您提供参考。

慢病毒在不同系统中的注射参数

1.   神经系统









2.   心血管系统





3.   肝脏





4.    肺





5. 肾



以上代表文献均来自权威杂志，其他文献为同一注射部位的其他参考文献，由于篇幅限制，不详细列举，若感兴趣可扫描相应二维码下载查阅。



慢病毒注射实验步骤
慢病毒的注射方法主要可以分为系统性注射和原位注射两种方法，下面分别简要介绍。

系统性注射——尾静脉注射
1. 首先提取小鼠尾巴，将其放在鼠笼盖或手背上，并进行适当安抚。
2. 然后将小鼠装入固定器中，盖紧盖子，并使其尾巴朝外露出。
3. 用酒精棉球擦拭小鼠尾巴，使其血管扩张( 或利用热水、浴霸加热)。
4. 将鼠尾拉直，使其红色静脉清晰可见。
5. 距鼠尾尖1/3 处进针，若进针畅通无阻，则说明针头在血管内。
6. 检查针管内有无回血，如有回血，则可以注射药物。
7. 用棉球按压注射点1min 左右止血。
8. 最后，将小鼠从固定器上取下，放回笼中。



系统性注射——腹腔注射
1. 首先从笼中提取小鼠尾巴，并将其放在手背上，进行适当安抚。
2. 然后左手握小鼠，用拇指、食指捏住小鼠颈背部，用无名指及小指固定其尾和后肢，腹部向上，头呈低位。
3. 右手持注射器，插入小鼠腹部，注射部位为下腹部离腹白线约0.5cm 处，使针头与小鼠腹部约成30°角刺入腹腔，针头刺入的速度要快，刚开始刺时会有一种明显的抵抗力，那是因为鼠皮具有韧性，后来突然会有一种抵抗力消失的感觉，说明针头已刺入腹腔内，此时回抽没有回血，说明针头没有进入脏器，就可以进行注射。（注意：针头刺入腹腔不宜超过1cm，进针动作要轻柔，防止刺伤腹部器官。）
4. 注射完病毒后，缓缓拔出针头，并轻微旋转针头，防止漏液。
5. 最后，将小鼠重新放回笼中，继续饲养观察。


原位注射——脑立体定位注射

第一部分：实验前准备
1. 首先麻醉小鼠。
2. 然后从饲养笼中取出小鼠。5-10min 后，麻醉剂起效。
3. 待小鼠麻醉后，用剃毛器将小鼠头部毛发剔除干净。

第二部分：固定小鼠
1. 将麻醉剔毛后的小鼠固定到立体定位仪上。
2. 固定时，先将小鼠门齿卡在适配器门齿夹上，轻轻压上门齿夹横杆，调整适配器高度和前后，使耳杆可以方便进入小鼠外耳道。
3. 左手托起小鼠头部，将左侧耳杆插入小鼠耳道，调节左右侧耳杆使动物头部保持在U 型开口的中心位置，先锁紧固定一侧耳杆，后旋紧另一侧耳杆，使动物头部不能晃动，同时旋紧门齿夹螺丝。
4. 检查是否固定成功：鼻对正中，头部不动，提尾不掉，目测大脑放置水平。
5. 用脱毛膏或者剃刀将需要手术部位的毛发去除。
6. 然后用手术刀划开小鼠头部皮肤，去除颅骨表面结缔组织，暴露前后囟。
7. 根据脑图谱，确定待注射脑区的位置参数，包含离Bregma 和Lambda点的距离以及核团深度。
8. 以Bregma 为0 点，按照预先确定好的坐标移动颅骨钻，打开合适大小的骨窗（窗口尽量小但是又不妨碍实验）。小心地用颅骨钻在注射位点处轻磨颅骨，将颅骨慢慢打薄，当颅骨出现裂缝的时候，用医用注射器的针头小心挑破，防止损伤，如果在此过程中有出血，可以用很小的医药棉球拉成长条形将血吸走，钻孔时一定要控制好，否则很容易在钻通颅骨后一不小心钻头进入脑组织，造成损伤。

第三部分: 注射病毒
1. 用PBS 冲洗微量注射器3-5 次。
2. 先吸取1μl 空气，再吸取1μl 稀释好的病毒( 方便病毒充分注射进脑)，在空气中测试注射器是否通畅；
3. 将微量注射泵，微量注射器组装好，置于钻好的孔上方，针尖与颅骨平行(Z=0)，微调注射器位置使之与之前钻孔时位置相同。
4. 根据定好的深度将注射针缓慢下降。



原位注射方式多样，由于篇幅限制，其他注射方式不详细列举。请扫描二维码登录吉凯基因网上商城干货区详细了解，更有动物实验操作视频等。





相关产品
慢病毒包装/载体构建一站式服务
腺相关病毒AAV
逆转录病毒
腺病毒
慢病毒/腺病毒/AAV腺相关病毒等全线病毒产品服务

慢病毒应用于在体注射信息由上海吉凯基因医学科技股份有限公司为您提供，如您想了解更多关于慢病毒应用于在体注射报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途