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抑制性消减杂交(SSH)文库构建

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  SSH技术是1996年由Diatchenko等发展起来的。该方法运用了杂交二级动力学原理,即丰度到的单链DNA在退火时产生同源杂交的速度快于丰度低的单链DNA,从而使原来在丰度上有差别的单链DNA相对含量达到基本一直。而抑制PCR则是利用链内退火优于链间退火的特性,使非目的序列片段两端反向重复序列在退火时产生类似发夹的互补结构,无法作为模板与引物配对,从而选择性地抑制了非目的基因片段的扩增。这样即利用了消减杂交技术的消减富集,又利用了抑制PCR技术进行了高效率的动力学富集。

该技术的应用:

我们可以利用这种有效的技术来比较两个mRNA群体,并获得只在一个群体中过量表达或特异性表达的基因的cDNA。

我公司采用Clontech公司 PCR-SelectTM cDNA Subtraction Kit构建差减文库,操作精准、经验丰富,已完成上百个SSH文库的构建(包括植物组织、动物组织、临床样本、微生物等各种样本)。

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