使用系统化筛查方案提高方法开发的效率

在方法开发过程中，我们需要筛查一系列的色谱参数才能使方法达 到足够的分离度并实现稳定的分离。 进行方法开发的途径多种多样， 例如每次更改一个因子的方法、系统化方法、质量源于设计(QbD)法 等等，而采用这些方法优化分离时，需要考虑的因子以及最终的目 标都是相同的。在所有的因子中，我们要调整的参数主要包括色谱 柱填料、有机溶剂、pH、梯度斜率、流速和温度。 

在方法开发过程中，我们需要系统地评估修改这些参数之后产生的 影响。每一轮优化之后，我们都要依照具体的标准(例如保留性、分 离度和拖尾值满足特定标准的目标峰的最大数量)对新方法进行评估， 然后从每个步骤中选出最佳方法以待进一步研究，直至获得最适用 的方法。整个开发过程的重点是要确保每个步骤都能选出最佳条件， 而且所做的选择必须有理有据。 

无论选择何种优化策略，在所研究的实验条件下鉴定和追踪关键样 品组分都具有重要意义。由于峰洗脱顺序可能发生变化且相关物质 的UV光谱可能发生重叠，因此如果条件允许，我们可采用相同的实 验条件，通过依次进样标准品来简化分析。尽管这种方法最终能够 给出有效的结果，但其过程相当耗时。而使用质谱检测替代光学检 测可实现明确鉴定，还有助于分析人员监测样品组分，快速鉴定和 追踪共洗脱组分以及洗脱顺序的变化。 

本应用纪要介绍了盐酸甲氧氯普胺及其相关物质的UPLC分析方法的 开发过程。我们将UV(PDA)和质谱检测相结合，应用了用户友好的 ACQUITY QDa质谱检测器。方法开发过程采用了系统化方案，包括探 索、筛查和优化三个步骤。我们利用自定义计算功能分析每个步骤 的结果并对其进行排序，然后在Empower 3色谱数据软件中进行报告， 最大程度降低了制定决策时由于分析人员造成的偏差，确保实现总 体目标。