临床研究中血清睾酮、雄烯二酮和硫酸脱氢表雄酮的分析

睾酮、雄烯二酮和硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)是属于雄激素的类固醇激素，与性 别特征的调节有关。通过LC-MS/MS分析这些结构相似的类固醇激素时，可以 从三个层面提升分析的选择性：样品制备过程、液相色谱分离和采用多反应监 测(MRM)进行的质谱检测。我们之前已经开发了一种采用Oasis MAX µElution SPE板的高选择性样品制备方法，该方法能够使睾酮和雄烯二酮分析达到出色 的灵敏度1 。然而，随着目标分析物DHEAS的加入，这种SPE方法不再适用， 因为它会通过阴离子交换机制不可逆地键合DHEAS。因此，我们需要更适用 于该组类固醇的样品制备方案。 

本文介绍了一种使用Oasis PRiME HLB µElution板技术从血清中提取睾酮、雄 烯二酮和DHEAS的临床研究方法，且该方法已在Tecan Freedom Evo 100/4液 体处理器上实现了自动化。该方法使用配备ACQUITY UPLC HSS T3 VanGuard预柱和ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱的ACQUITY UPLC I-Class系 统进行色谱分离，然后在Xevo TQD质谱仪上进行检测(图1)。此外，我们还评 估了睾酮、雄烯二酮和DHEAS的外部质量评估(EQA)样品，目的是评估在临床 研究中采用该方法分析睾酮、雄烯二酮和DHEAS的偏差与适用性。