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在多样本比较、疾病机制解析与药物靶点筛选中，iTRAQ定量蛋白质组学技术以其高通量、高灵敏度和高一致性的优势，受到越来越多科研人员青睐。   一、iTRAQ技术原理详解：如何实现多样本蛋白定量？ iTRAQ 是基于质谱标记的相对和绝对定量方法，利用同位素标签对不同样本中的肽段进行等质量标记，在MS/MS级别释放出不同质量的“报告离子”，通过其强度实现定量。  1、iTRAQ标记结构： 每个iTRAQ试剂由三部分组成： （1）报告离子（Reporter group）：114–121 Da，标志不同样本 （2）平衡组（Balance group）：调节整体分子量一致 （3）肽反应基团（Peptide reactive group）：与肽段N端和赖氨酸侧链反应多种标签等质量设计确保所有标记肽段在一级质谱中质量完全一致，在二级质谱中通过报告离子质量区分。   2、iTRAQ实验流程简述： （1）蛋白提取 → 胰蛋白酶酶解； （2）每个样本分别用不同iTRAQ标签（如114、115、116…）标记肽段； （3）所有标记肽混合，进行液相色谱分离 + 高分辨率LC-MS/MS分析； （4）MS/MS碎裂时释放出......