FAQ系列5_初始荧光值无规律变化

初始荧光值无规律变化 

由于每根毛细管内Target荧光分子数是一样的，因此16根毛细管初始荧光值应该是均一的（允许的波动范围为±20%）。当初始荧光值无规律的不均一（超过20%阈值），可能的原因和建议如下:

1. 样品质量：buffer不合适，造成样品轻微聚集到PCR管底；
2. 耗材有吸附：枪头或者PCR管吸附Target分子；
3. 移液不准确或者未混匀；
4. 移液器不准：确保移液器工作正常，且近期被校准过；
5. 混匀时，用至少一半的体积上下抽吸混匀，将样品彻底混匀；不要用涡旋或者轻弹的方式；
6. 准备不少于10uL Target+10uL Ligand的反应体系。

当某几根毛细管荧光值波动超过±20%，则对应的数据点不能用于分析，需要去掉。

具体详见下篇FAQ

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FAQ 初始荧光值无规律变化_Random Changes in Initial Fluorescence.pdf

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