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植物互作研究中的难点和MST的解决方案
发布时间：
2022-11-15 16:08
来源：
诺坦普科技（北京）有限公司
| 领域： | 分子生物学,蛋白/抗体/蛋白质组,粮油及淀粉豆制品等制品,生物成像 | ||
| 样品： | 植物组织 | 项目： | 植物蛋白和其他分子 |
| 参考： | Oliveira Andrade, Maxuel, et al. "The MAF1 phosphoregulatory region controls MAF1 interaction with the RNA polymerase III C34 subunit and transcriptional repression in plants." Plant Cell 32.9 (2020): 3019-3035. | ||
| 方案文件名 | 下载 |
|---|---|
植物互作研究中的难点和MST的解决方案 |
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方案摘要：
在植物领域的互作研究中，可能会遇到各种困难：
1. 蛋白与小分子互作：植物信号通路研究中常涉及到膜蛋白与离子/激素类等小分子（1kD以下）的互作，分子量差异大，互作检测信噪比低；
2. 难纯化：植物蛋白原核表达后常处于包涵体内，较难提纯；转基因植物蛋白表达量低，难纯化，且植物自发荧光高；GFP融合表达蛋白，无法纯化；体外缓冲液条件下无互作
3. 竞争结合实验：传统的竞争结合实验（Pull Down，BiFC等）操作步骤繁琐，假阳性高，样品消耗量大，且无法定量分析结合同一个目标的两种或以上分子的亲和力；
4. 蛋白质和核酸互作：常规EMSA的检测方法步骤繁琐，且涉及到放射性同位素等有害物质，同时无法进准确定量；RNA易降解；
5. 样品准备周期长，处理繁复，样品珍贵且数量少。传统互作实验样品消耗量大
这些问题均可使用MST分子互作技术一一解决！
