奥谱天成(厦门)光电有限公司

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【已收藏】蛋白质快速检测的定量方法,基于超微量分光光度计的应用实测

发布时间: 2020-11-25 01:00 来源:奥谱天成(厦门)光电有限公司

超微量分光光度计本身就是一类很重要的分析仪器,无论是物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境学等科学研究领域,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理部门都有很重要的应用。

超微量分光光度计

奥谱天成的全波长(190~1000 nm)超微量分光光度计NanoBio 200,基于20余年的光谱仪器研制经验,采用自产的高性能光纤光谱仪和日本滨松公司生产的高稳定性脉冲氙灯,能够快速准确的检测核酸、蛋白质。

同时,它还具有使用方便、消耗样品少(仅0.5~2μl)、不用预热、能迅速清理残留样品、不需要比色皿或其它样品定位装置、样品不需要稀释等特点。

测试项目

蛋白质定量方法

酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm处具有最大吸收,且各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大,因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的蛋白质

蛋白质溶液在238nm处的光吸收的强弱,与肽键的多少成正比。因此可以用标准蛋白质溶液配制以A238为纵座标,蛋白质含量为横座标,绘制出标准曲线。本方法比280nm吸收法灵敏。但多种有机物,如醇、酮、醛、醚、有机酸、酰胺类和过氧化物等都有干扰作用。

含有核酸的蛋白质溶液,可分别测定其A280和A260,经验公式如下:蛋白质浓度=1.45XA280-0.74XA260(单位:mg/ml)

非纯蛋白,则用试剂盒法:BCA、Bradford、lowry法等标准曲线法

测试过程非常简单

1.点样:抬起测量盖,用移液器从样品中吸取1-2μL,滴在液滴座上

2.形成测量液柱:将测量盖轻轻合上,形成测量液柱。

3.开始测量:从触摸屏上选择需要进行的测量项目,进行相应的测试。3s内,即可得到相应的结果。

4.擦拭样品台:抬起测量台,用擦镜纸将液滴座上的残留液体擦拭干净,注意上下液滴座都要擦拭。

蛋白质检测——试剂盒法

蛋白质检测——A280法


蛋白质

A280法:A280测蛋白质样品浓度,包括

1Abs=1mg/mL,BSA,IgG,Lysozyme

试剂盒法:试剂盒法(Lowry法、BCA法、Bradford法)测定蛋白质浓度,软件自动绘制标准曲线,直接给出浓度值。

物质吸收谱图

蛋白质在紫外280nm左右具 有最大吸收峰

奥谱天成超微量分光光度计与传统分光光度计的区别与优势

所需样品体积小,仅需0.5~2μ

不需要比色皿,用移液枪直接将样品滴加到检测平台上,测量时样品会自动形成液柱

只需用干净的吸水纸将样品从检测平台上擦拭干净即可

多个固定光程(可选):1, 0.25 and 0.05mm;

样品无需稀释,测量范围可达到常规分光光度计的50倍

光源为脉冲氙灯,寿命长达10年,性能稳定

不需要预热,可随时检测

显示吸光度值同时,同时直接给出浓度值

体积小(29×21×22 cm3),质量轻(3.0 kg)


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