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QuantiTect Probe RT-PCR Kit 试剂盒

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参考报价: 面议 型号: 6-6
品牌: QIAGEN 产地: 德国
关注度: 634 信息完整度:
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AI问答
可以做哪些实验,检测什么? 可以用哪些耗材和试剂?

QuantiTect Probe RT-PCR Kit 试剂盒使用序列特异性探针进行一步法real-time RT-PCR,用于基因表达分析

  • 灵敏检测低拷贝数模板

  • 准确检测各种起始量的模板

  • 可用各种序列特异性探针,用于各种PCR仪

  • 无需优化反应和循环条件

QuantiTect Probe RT-PCR Kit使用序列特异性探针通过一步法real-time PCR对RNA目标序列进行灵敏的定量分析。即用型预混液使用热启动和独特的PCR缓冲液,无需优化即可在各种real-time PCR仪上进行高度灵敏的定量RT-PCR。dNTP混合液含有dUTP,可选择性进行UNG处理。为便于使用,预混液可储存在2–8°C。

性能

QuantiTect Probe RT-PCR Kit含有独特的RT-PCR缓冲液,可促使引物高度特异性的退火并与PCR模板结合。含有的HotStarTaq DNA Polymerase与其他聚合酶相比,具有严格的热启动。

QuantiTect Probe RT-PCR Kit包括HotStarTaq DNA聚合酶和独特的RT-PCR缓冲液,能够高灵敏度的定量检测低拷贝的RNA靶序列,在宽泛的范围内符合线性规律,实现准确定量检测。在同一个管中连续进行逆转录和PCR不会影响灵敏度,通过与两步法real-time RT-PCR的CT值对比可证明。

一步法RT-PCR和两步法RT-PCR有相当的表现
cDNA/RNA的量平均CT平均CT
(两步法RT-PCR)(一步法RT-PCR)
100 ng24.6624.66
10 ng28.1527.84
1 ng31.4231.49
0.1 ng34.8034.56
0.01 ng37.7837.66
CT值来自图"One-step RT-PCR with comparable performance to two-step RT-PCR — A" 和"One-step RT-PCR with comparable performance to two-step RT-PCR — B"的两个扩增曲线。

原理

QuantiTect Probe RT-PCR Kit含有优化的即用型预混液,可使用序列特异性探针对RNA靶序列进行高特异性和灵敏度的real-time定量分析。此试剂盒适用于各种类型的序列特异性探针,包括水解探针检测(如TaqMan和其他双标记探针)、FRET探针和Molecular Beacons。QuantiTect Probe RT-PCR Kit独特的PCR缓冲液含有浓度平衡的K+和NH4+,能促使特异性引物退火,获得高PCR特异性和灵敏度。此外,优化的逆转录酶混合液可从不同量的RNA模板合成cDNA,而HotStarTaq DNA Polymerase具有严格的热启动,可防止非特异性产物的形成。

QuantiTect Probe RT-PCR Master Mix含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶 (UNG)预处理,保证污染的PCR产物不会影响后续的PCR反应。

2x QuantiTect Probe RT-PCR Kit的组份
组份特点优势
HotStarTaq DNA Polymerase95oC孵育15分钟即可活化室温下即可构建qPCR反应体系
QuantiTect Probe RT-PCR BufferNH4+和K+的平衡组合特异性引物退火确保PCR结果可靠
dNTP mix含有dUTP,会部分替代dTTP,可进行UNG处理可选择进行UNG处理,以消除PCR产物中的残余污染物
ROX dye在Applied Biosystems或Agilent的PCR仪上进行荧光信号校准可在需要ROX染料的PCR仪上进行准确的定量检测。不会干扰其他real-time PCR仪
Omniscript and Sensiscript Reverse Transcriptases多种酶,对RNA亲和性高RNA、甚至是具有复杂二级结构的RNA均可实现转录
 

操作流程

QuantiTect Probe RT-PCR Kit无需优化反应条件。只需将引物、探针和RNA模板加入到即用型RT-PCR预混液中,即可开始反应。按照使用手册中的实验方案操作,即可快速获得可靠的结果,适用于各种real-time PCR仪。如果需要,可使用UNG进行预处理,去除上一反应残留的PCR产物。

应用

QuantiTect Probe RT-PCR Kit可用在各种real-time PCR仪上对RNA目标序列进行基因表达分析,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时,我们推荐专门为快速PCR研发的Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit。

QuantiTect Probe RT-PCR Kit 试剂盒


QuantiTect Probe RT-PCR Kit 试剂盒信息由北京布拉德科技发展有限公司为您提供,如您想了解更多关于QuantiTect Probe RT-PCR Kit 试剂盒报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。

注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

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