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安捷伦科技（中国）有限公司
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一韦仪器HG24高通量组织研磨仪用于猪趾骨胶原蛋白提取的样品前处理方案
冯伟-上海一韦仪器科技有限公司
方案概述
猪趾骨富含I型胶原蛋白，是骨组织工程和胶原蛋白研究的重要原料来源。骨骼组织致密坚硬，传统球磨或手工破碎效率低、耗时长，且研磨产热易导致胶原蛋白变性。一韦仪器HG24高通量组织研磨仪配合不锈钢研磨罐和大直径不锈钢珠，经液氮深度冷冻脆化后，可在30秒内将猪趾骨高效破碎至微细粉末，胶原蛋白提取率显著提升，适用于骨胶原蛋白开发、骨组织工程支架材料研究及食品级胶原蛋白原料检测。
实验仪器和材料
仪器：一韦仪器HG24高通量组织研磨仪、不锈钢研磨罐（25ml）及适配器
材料：新鲜猪趾骨（去除软骨及附着软组织）、8mm不锈钢研磨珠、液氮、0.5M乙酸溶液
实验步骤
1. 取新鲜猪趾骨，去除软骨、肌腱及附着软组织，用去离子水冲洗干净，吸水纸吸干表面水分。
2. 用骨钳将趾骨剪成1～2cm小块，称取约3～5g放入不锈钢研磨罐中，每罐加入4颗8mm不锈钢研磨珠。
3. 将研磨罐浸入液氮中冷冻1～2分钟，直至液氮不再剧烈沸腾。
4. 取出研磨罐迅速固定于HG24主机，设置参数：频率60Hz，时间30秒，可设置2个研磨循环。
5. 启动研磨程序，研磨完成后收集骨粉，加入0.5M乙酸溶液于4℃搅拌提取24～48小时，离心取上清用于胶原蛋白含量测定及SDS-PAGE分析。
实验数据预期
出样粒度：≤100μm
胶原蛋白提取率：≥85%
平行样品RSD：＜5%
结论
一韦仪器HG24高通量组织研磨仪配合液氮冷冻脆化，可在30秒内将猪趾骨高效破碎为均匀细粉，胶原蛋白提取率和纯度均满足后续研究要求。全封闭研磨避免样品交叉污染，适用于骨胶原蛋白开发、骨组织工程材料研究及食品级胶原蛋白原料检测等领域。
