青莲百奥PRM靶向蛋白组相对定量

靶向蛋白质组技术，顾名思义是只选取和检测目标蛋白相关的信号，忽略其他无关的信号，因此可以实现对目标蛋白定量的高特异性和高准确性。PRM是Labelfree 、iTRAQ/TMT等组学技术的好伙伴。大规模组学技术不可避免地存在定量假阳性的问题，组学结果往往需要采用特异性的检测方法来验证。目前常规的方法如蛋白水平WB、ELISA，而PRM在后续靶蛋白验证方面具有独特的优势：不依赖抗体，可选择性、特 异性地对目标蛋白质进行定性定量分析（或定量分析）。

PRM（平行反应监测，Parallel Reaction Monitoring）是一种基于较高分辨、较高精度质谱的靶向蛋白质组学技术，能够对目标蛋白质、目标肽段有针对性的选择数据进行质谱数据采集，对于符合目标离子规则的信号进行采集，去除不符合规则的离子信号的干扰。从而实现对目标蛋白质/肽段进行定性定量。

技术原理

PRM是相对于传统SRM/MRM建立起来的高分辨率离子监测技术。PRM基于Q. Orbitrap为代表的四级杄-高分辨质谱平台,与SRM每次扫描一个Transition不同,PRM每次对一个母离子生的所有Transition进行全扫描,即平行监测了一个母离子对应的所有离子对。PRM质谱分析经过三个阶段:1,通过MS筛选岀与目标分子特异性一致的母离子;2,碰撞碎裂这些母离子,去其他离子的干扰;3.只对选定的特异MS/MS2离子进行质谱信号的采集。PRM质谱技术是高精准度的蛋白定量鉴定技术,是一次性精准定量硏究复杂样品中多个目标蛋白的绝佳方法。如果借助同位素标记的目标肽段作为内参,可以实现蛋白定量鉴定。

PRM技术流程图

技术优势

1.较高分辨离子监测，质量精度达ppm级，在不损失灵敏度的情况下，大程度排除了背景干扰；

2.MS2为全扫描，无需事先确定离子对和优化碰撞能量，只需要在数据处理时选择响应较高的一个或几个离子即可提取母离子对的色谱峰进行定量，线性范围可达5-6个数量级；

3.同时定性与定量分析，二级全扫描谱图用于定性分析，选择其中优质的子离子提取离子对即可完成定量分析。

与传统WB/ELISA相比有独特优势

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