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工商注册信息已核实!领域: | 分子生物学,基因/基因组/测序 | ||
样品: | 细胞基因组DNA | 项目: | 细胞鉴定 |
参考: | Authentication of Human Cell Lines: Standardization of STR Profiling. ANSI/ATCC ASN-0002-2011. ,Capes-Davis, A., et al. Match criteria for human cell line authentication: Where do we draw the line? Int. J. Cancer 132, 2510–2519 (2013) AB |
方案文件名 | 下载 |
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使用DS3000 Compact CE Sequencer 进行细胞鉴定的实例 |
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细胞株的误识别或污染,将对实验结果有很大的影响。 因此,推荐定期实施细胞株鉴定(Cell Line Authentication: CLA),并确认无外来细胞的混入或置换。 在CLA中,广泛使用对STR(Short Tandem Repeat)进行分析的方法。 STR是散布在基因组中的以2-7个碱基短串联重复序列。 不同个体间的STR的重复次数(等位基因)各不相同,因此STR是DNA鉴定中很有用的标记。 在CLA中首先用PCR扩增多个STR后,通过毛细管电泳鉴定每个等位基因。 然后,将已鉴定的等位基因与在ATCC(American Type Culture Collection)等生物资源中心注册的各个的等位基因(以下,标记为参考等位基因)相比较而鉴定细胞株(1)。 此时,为了获取高可靠性的结果,仪器需要具有高分析性能。
在此,介绍使用DS3000 Compact CE Sequencer (以下简称DS3000)时的CLA实例。 用GenePrint® 10 System与GenePrint® 24 System (Promega®)验证的结果,以DS3000获取的等位基因与参考等位基因的一致程度为大于等于80%时,将其判断为相同细胞(2)。 由此可知,DS3000具有可进行CLA的分析性能。