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安捷伦科技（中国）有限公司
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Agilent X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷，BCIG）是一种优质 β-半乳糖苷酶显色底物。该底物可用于利用 β-半乳糖苷酶活性作为成功克隆指标的克隆系统。研究证明，X-gal 能够提高某些应用的分析能力，这些应用中的 β-半乳糖苷酶活性可作为非重组指标。
高效 96 Pack Gold 感受态细胞以高通量克隆形式简便包装，以便快速转化。只需添加 DNA，热休克，并将生长培养基直接添加到培养皿中。该实验方案可节省时间和试剂，同时提供最佳结果。为了方便起见，我们提供定制配置、配方和包装选项。
当您不需要高级感受态效率时，可选择 JM101 感受态细胞，它是用于经济克隆的经典大肠杆菌菌株。大肠杆菌 K12 JM101 是高效重组和大肠杆菌 K12 高效限制性宿主菌株。在完全成功转化后，内在抗生素抗性有助于细胞筛选。
JM109 感受态细胞是用于常规克隆和质粒维持的经典大肠杆菌菌株。大肠杆菌 K12 JM109 为重组和内切核酸酶缺陷型，分别提高了插入片段稳定性和 miniprep DNA 质量。hsdR 突变防止了 EcoK 核酸内切酶系统对克隆 DNA 的切割。
大多数大肠杆菌宿主含有 DNA 腺嘌呤甲基化 (dam) 和 DNA 胞嘧啶甲基化 (dcm) 基因。这些基因编码 DNA 增殖时甲基化特定序列的蛋白质，使对甲基化敏感的限制性内切酶随后无法进行消解。 SCS110 菌株缺乏 dam 和 dcm 活性。在该菌株中繁殖的 DNA 可被 Xba I、Cla I 和 EcoR II 等甲基化敏感酶消解。JM110 菌株可用于制备不含 Dam 或 Dcm 甲基化的质粒或噬菌粒 DNA，从而可通过一种或多种甲基化敏感性限制性内切酶对 DNA 进行限制性消解。JM110 缺乏多数大肠杆菌菌株中发现的两种甲基化酶（Dam 和 Dcm）。Dam 甲基化酶识别 DNA 序列 GATC 并在 N-6 位置将腺嘌呤残基甲基化，而 Dcm 甲基化酶识别 DNA 序列 CCAGG 和 CCTGG 并在 C-5 位置将内部胞嘧啶甲基化。JM110 细胞在 F’ 附加体上含有 lacIqZΔM15 基因，可对重组质粒进行蓝白斑筛选。
当您不需要高级感受态效率时，可选择 NM6522 感受态细胞，它是用于经济克隆的经典大肠杆菌菌株。NM522 为高效重组与 EcoK 限制性缺陷的宿主菌株。在完全成功转化后，内在抗生素抗性有助于细胞筛选。
用于生成未甲基化 DNA 的 SCS110 感受态细胞也是一种 EndA- 变体，极大提高了质粒 miniprep DNA 的产量和质量。 SCS110 是 JM110 菌株的一种 endA 衍生物。SCS110 菌株可用于制备不含 Dam 或 Dcm 甲基化的质粒或噬菌粒 DNA，从而可通过一种或多种甲基化敏感性限制性内切酶对 DNA 进行限制性消解。SCS110 缺乏多数大肠杆菌菌株中发现的两种甲基化酶（Dam 和 Dcm）。Dam 甲基化酶识别 DNA 序列 GATC 并在 N-6 位置将腺嘌呤残基甲基化，而 Dcm 甲基化酶识别 DNA 序列 CCAGG 和 CCTGG 并在 C-5 位置将内部胞嘧啶甲基化。SCS110 细胞为核酸内切酶 (endA) 缺陷型，显著提高了 miniprep DNA 的质量。SCS110 细胞在 F’ 附加体上含有 lacIqZΔM15 基因，可对重组质粒进行蓝白斑筛选。
这一系列的感受态细胞（包括 SCSI 高级感受态细胞和 DH5α 感受态细胞）由经典的大肠杆菌菌株组成，这些菌株经设计后能够成为感受态细胞用于克隆实验。
SoloPack Gold 细胞为日常克隆提供高效的单管转化效率和便利性。使用 SoloPack 单反应形式，不需要解冻、等分和再冻结。只解冻需要的细胞。移液步骤较少，因为整个转化反应发生在提供的管中。
XL-1 Blue MRF’ 和 XL-1 Blue MR 感受态细胞可用于甲基化 DNA 的高效率和代表性克隆。已去除所有已知的大肠杆菌 K12 限制性系统。当克隆甲基化 cDNA/基因组 DNA 或甲基化 PCR 产物时，使用 XL1-Blue MRF’ 细胞。当不需要 F’ 附加体和蓝白斑筛选时，可以使用 XL1-Blue MR 高级感受态细胞。当克隆四环素抗性质粒时，使用 XL1-Blue MRF' Kan 高级感受态细胞选择 F’ 附加体，并选择强度更高的蓝色进行蓝白斑筛选。
用于常规克隆的 XL-1 Blue 感受态细胞可进行蓝白斑筛选、噬菌粒 DNA 的单链拯救和高质量质粒 DNA 的制备。衍生物能够实现更高的转化效率、甲基化 DNA 的转化、抗生素抗性的选择并且无 F’ 附加体。为了获得最大数量的菌落，可使用电转化感受态 XL1-Blue 细胞或高效衍生物 XL2-Blue 超级感受态细胞。当最终效率不那么重要时，可尝试高级感受态等级、感受态等级或亚克隆等级的感受态细胞。
当 DNA 以不同于细菌宿主模式的方式甲基化时，它会被大肠杆菌宿主限制性系统切割。在宿主复制之前切割 DNA 会产生缺乏完整代表性的文库。我们的 MR（无限制性内切酶）系列感受态细胞缺乏所有已知的大肠杆菌 K12 限制性内切酶系统，可以克隆甲基化 DNA，这在表观遗传学研究中非常有用，其中 DNA 甲基化而非 DNA 序列变化可能与基因表达或细胞表型的遗传变化有关。XL2-Blue MRF’ 超级感受态细胞是我们的 XL1-Blue MRF 高级感受态细胞的高效衍生物。利用超级感受态细胞技术，我们已经实现了大于 5 x 109 转化株/µg pUC18 DNA 的转化效率，使这些超级感受态细胞成为高效克隆的理想选择。XL2-Blue MRF'（无限制性内切酶）菌株缺乏所有已知的限制性系统（McrA–、McrCB–、McrF–、Mrr–、HsdR–），防止通常存在于真核 DNA 和 cDNA 中含有胞嘧啶和/或腺嘌呤甲基化的克隆 DNA 被切割。 XL2-Blue MRF’ 细胞不含限制性内切酶。该菌株的内切核酸酶 (endA) 缺陷大大提高了 miniprep DNA 的质量，重组 (recA) 缺陷型则有助于确保插入片段稳定性。这些细胞可对重组质粒进行蓝白斑筛选
XL-1 Red 感受态细胞可通过高效、快速而可重现的方法将随机突变引入目标克隆基因中。该方法包括将克隆基因繁殖到 XL-1 Red 感受态细胞中，后者是三种主要 DNA 修复通路缺陷的一种大肠杆菌菌株。利用基础细菌遗传学手段将 mutS、mutD 和 mutT 突变引入 XL-1 Red 菌株。测得该三重突变株中的随机突变率比野生型高 5000 倍左右。
用于毒性克隆的 ABLE C 感受态细胞能提高克隆毒性蛋白质编码 DNA 的几率。ABLE C 菌株通过减少 ColE1 来源的质粒拷贝数，降低了克隆基因产物的浓度，从而提高了繁殖毒性克隆的几率。 ABLE C 感受态细胞为具有高拷贝数的常用克隆载体提供了一种可行的替代方法。在初筛 Lambda 噬菌体文库时观察到的阳性克隆可以被去除或重新克隆到任何方便的载体中，并导入 ABLE C 菌株中。
用于毒性克隆的 ABLE K 感受态细胞能提高克隆毒性蛋白质编码 DNA 的几率。ABLE K 菌株通过减少 ColE1 来源的质粒拷贝数，降低了克隆基因产物的浓度，从而提高了繁殖毒性克隆的几率。 ABLE K 感受态细胞为具有高拷贝数的常用克隆载体提供了一种可行的替代方法。在初筛 Lambda 噬菌体文库时观察到的阳性克隆可以被去除或重新克隆到任何方便的载体中，并导入 ABLE K 菌株中。
ABLE C 和 ABLE K 菌株通过调节质粒拷贝数来增强对大肠杆菌有毒克隆的可获取性。该拷贝数的减少会降低克隆基因产物的浓度从而提高繁殖毒性克隆的几率。这一包装包含两种菌株。与 XL1-blue 菌株相比，ABLE C 菌株将普通克隆载体的拷贝数减少为 1/4 左右。与 XL1-blue 菌株相比，ABLE K 菌株将普通克隆载体的拷贝数减少为 1/10 左右。
了解在带有高灵敏度 DNA ScreenTape 胶条的 Agilent TapeStation 系统上进行自动化 DNA 电泳的便捷性。高灵敏度 DNA ScreenTape 分析为珍贵样品和/或有限数量的 NGS 文库 QC 数据提供快速、自动化的分析和灵活的解决方案。 Agilent ElectroTen-Blue 电转化感受态细胞提供了最高的转化效率，显著改善了大质粒和 DNA 连接产物的克隆。这些细胞还可提供最高的电转化效率 (Hee) 表型，其在苛刻的电转化条件下弹性增强。
在原核细胞中复制真核 DNA 可能存在问题。特定的真核基因可能包含反向重复或二级结构，如 Z-DNA，可以由大肠杆菌 DNA 修复系统进行重排或去除。 SURE 感受态细胞缺乏参与 DNA 重排和缺失的大肠杆菌基因，从而提高了原核细胞中含有不规则结构的 DNA 的克隆效率。SURE 细胞不含限制性内切酶（McrA-、McrCB-、McrF-、Mrr-、HsdR-），为限制性内切酶 (endA) 缺陷型和重组 (recB recJ) 缺陷型。
能够产生大于 1 x 1010 转化株/µg DNA 的电转化感受态细胞。这些可电转化的细胞仅需解冻，与 DNA 混合并进行电转化。推荐将 TG1 电转化感受态细胞用于制备噬菌体展示文库。
XL10-Gold 超级感受态细胞设计用于克隆大质粒和 DNA 连接产物，转化效率最高，同时生长更快且菌落更大。XL10-Gold 超级感受态细胞具有高转化率表型 (Hte)，使这些细胞转化超螺旋 DNA 的平均转化效率 ≥ 5 x 109 转化株/µg。该菌株构建的质粒文库更具代表性，因为 XL10-Gold 细胞减少了对大插入片段的偏差。
高难度克隆感受态细胞包包含三种包装在一起的菌株，可提高实验室效率，经济地优化方案，并可以同时测试多个菌株。利用 XL10-Gold Kanr 超级感受态细胞转化大质粒或用于有限量的 DNA。利用 SURE 高级感受态细胞克隆含有反向重复序列或二级结构（如 Z-DNA）的 DNA 的真核细胞片段。利用 Able K 感受态细胞克隆任意来源于 ColE1 质粒中存在的毒性基因，并为大多数下游应用分离足够的 DNA。
