在 AdvanceBio SEC 聚集体分析之后进行 Protein A 亲和 IgG 捕获--采用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案

发布时间： 2022-02-14 03:20 来源：安捷伦科技（中国）有限公司

领域：	生物制药/仿制药
样品：	IgG	项目：	在 AdvanceBio SEC 聚集体分析之后进行 Protein A 亲和 IgG 捕获分析
参考：	使用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案分析单克隆抗体酶解物

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"This Application Note describes the quantification of aggregates in biotherapeutic 本应用简报介绍了使用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案对生物治疗样品中聚集体的定量分析。Protein A 亲和捕获在第一维中进行，而体积排阻色谱在第二维中进行。多中心切割用于将样品从第一维转移到第二维。这项技术能够在一次分析中完成整个表征，无需进行馏分收集和多次进样。

摘要

本应用简报介绍了使用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案对生物治疗样品中聚集体的定量分析。Protein A 亲和捕获在第一维中进行，而体积排阻色谱在第二维中进行。多中心切割用于将样品从第一维转移到第二维。这项技术能够在一次分析中完成整个表征，无需进行馏分收集和多次进样。

结论

Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案为在一个方法中测定 mAb 滴度和聚集体提供了一种通用而高效的方法，无需进行馏分收集和多重进样。 Agilent Bio-Monolith Protein A 亲和色谱柱作为二维液相色谱工作流程的第一维，有助于在滴度测定中实现 mAb 的分析级纯化，并可在聚集体分析前作为初始纯化步骤。Agilent AdvanceBio SEC 300 Å 色谱柱对聚集体与单体的分离表现出优异的分离度，可在二维液相色谱工作流程中作为第二维实现准确的评估。

参考文献

1. Vanhoenacker, G. 等，使用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案分析单克隆抗体酶解物，安捷伦科技公司应用简报，出版号 5991-2880CHCN，2013 2. Lohaus, C. 等，用 Agilent BioMonolith Protein A 亲和 HPLC 色谱柱快速测定人多克隆 IgG，安捷伦科技公司应用简报，出版号 5989-9733CHCN，2008 3. Duong, P. T. 采用 Agilent Bio-Monolith Protein A 亲和色谱柱监测细胞培养液中的单克隆抗体滴度，安捷伦科技公司应用简报，出版号 5991-2990CHCN，2014

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