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领域: | 细胞生物学 | ||
样品: | 肿瘤细胞 | 项目: | 细胞分析 |
方案文件名 | 下载 |
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用 ACEA Quanteon 流式细胞仪检测 CTCs |
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循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells, CTCs)是指自发或因诊疗操作自实体肿瘤原发 灶或转移灶脱落进入外周血循环的肿瘤细胞,是肿瘤复发和发生远端转移的关键因素。CTCs 检测有助于恶性肿瘤的早期诊断、疗效监测、预后判断、耐药性评估等,其临床应用价值已 被广泛认可。CTCs 在患者血液中的含量非常稀少,大约每 106~107个白细胞中仅 1 个 至几个 CTCs 存在,灵敏度一直是其检测及应用的主要障碍。当前研究和鉴定 CTCs 的方法 很多,包括 CellSearch®系统、流式细胞术、微流控芯片、荧光定量 PCR 等,这些方法往往包括富集和鉴定两个主要步骤。
在众多文献报道中,人们常利用肿瘤细胞掺入试验评价CTCs检测方法/系统的灵敏度、 特异性、准确性、重复性等指标。本研究选用高表达 EpCAM 的结肠癌细胞株(SW620) 作为掺入细胞(图 1),第一部分将不同数量(0~256 个)SW620 细胞掺入到 1×106个正常人 PBMCs 中,用 ACEA Quanteon 流式细胞仪或对比机型检测 SW620 细胞的实际个数, 确定仪器检测 CTCs 的灵敏度。第二部分将不同数量(0~2000 个)SW620 细胞掺入到 2mL 健康人全血(正常人外周血中每毫升含 4-10×106个白细胞)中以模拟肿瘤患者的血样,应用免疫磁珠正向富集 EpCAM 阳性细胞结合荧光抗体标记后,用 ACEA Quanteon 流式细胞仪检测掺入肿瘤细胞的回收率,评估该样本处理体系和仪器检测体系检测 CTCs 的准确性和特异性
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