多参数 THP-1 细胞分化及细胞因子分泌表型分析 试验评价抗炎化合物

介绍

巨噬细胞起源于血液中的单核细胞，这些 单核细胞离开血液循环，分化成不同的组 织。巨噬细胞参与细菌和受损细胞的检测 和吞噬。此外，巨噬细胞通过释放细胞因 子引发炎症，细胞因子激活血管细胞，促 进细胞因子粘附血管并迁移到组织中。分 化的 THP-1 细胞已被广泛用于体外巨噬细 胞模型研究巨噬细胞参与炎症反应。人单 核细胞系 THP-1 可以通过佛波醇 12-十四 酸酯 13-乙酸酯 (PMA) 分化成巨噬细胞， 并通过 LPS 活化。活化的 THP-1 细胞改变 形态，分泌炎性细胞因子。监测细胞因子 的表达水平是炎症细胞模型的重要生理指 标。我们提出了多参数细胞分析的结果， 使用表型成像考察巨噬细胞形成和低体积 ELISA 分析细胞因子的分泌，以评估药理 学化合物对炎症反应的影响。PMA 和 LPS 刺激 THP-1 细胞 48 小时。PMA 和 LPS 激 活 THP-1 细胞后，IL-8、IL-1b 和 TNF-a 升高。为了评估抗炎化合物，细胞在激活 前分别接受激酶抑制剂 SB202190 和 PDTC 以及抗生素莫西沙星的处理。然后，通过 定量细胞因子分泌量来测定这些抗炎化合 物对炎症反应的抑制作用。利用表型成像 观察了巨噬细胞形成的影响。与报道的作 用机制一致，化合物 SB202190、PDTC 和 莫西沙星的细胞因子表达呈浓度依赖性下 降。