Milliplex高通量多因子检测平台

Milliplex多因子检测技术简介： 
Milliplex 多因子检测技术（xMAP技术）是将流式检测技术与芯片技术有机地结合在一起，以微球作为反应载体，实现了多种蛋白分子同时定量检测。  

(4G平台手册P3)

Milliplex多因子检测技术优势：

• 涉及领域zei广泛：免疫，神经，代谢，干细胞，心血管疾病,肿瘤，信号通路等。

• 样本需求少：只需25-50ul的样本，可同时检测多达四十多种蛋白标志物。

• 选择灵活：提供Pre-mix试剂或自由挑选因子组成一个自选试剂盒的两种选择。

• 操作流程简单。

• 超过900种蛋白因子可供选择。

• All-in-one-box，试剂盒中提供了实验所需要的所有试剂。

Milliplex多因子检测试剂盒新的应用：

1、Milliplex多因子检测技术在干细胞研究中的应用：
       诱导多能干细胞（iPSC）一直是今年来干细胞研究领域的热点。日本科学家Yamanaka （中山伸弥）在2012年因为iPSC获得了今年诺贝尔医学奖。Yamanaka教授筛选出了4个诱导多能干细胞相关基因（Oct4，Nanog, Sox2和c-Myc ），将人的表皮细胞诱导成为具有胚胎干细胞活性的细胞，并具备定向分化为心肌细胞和神经细胞的能力，因此也具备了心血管等疾病治疗的潜力。我们zei新推出的试剂盒检测的指标与Yamanaka教授筛选的指标完全相同（Oct-3/4, Sox2, Nanog 和c-Myc），可用于对iPS细胞的干细胞状态进行评价。 
       传统干细胞标志物的检测方法包括了ICC, WB或FC. 新方法Milliplex多因子检测技术的优势不单单在于干细胞用量少，所用时间短，更重要的是该方法可以对干细胞标志物同时进行绝对定量检测，有助于对iPS细胞状态进行准确和灵敏的判断。

图1 在诱导多能干细胞（iPSC）和对照细胞系HeLa（子宫颈癌细胞）、Ntera-2cl.D1（人胚胎睾丸癌细胞）中四个因子的表达。HFF细胞是用以制作iPSC 获得干细胞的细胞系。结果显示iPSC 中4 个干细胞相关因子的表达与对照细胞系HeLa 及 Ntera-2cl.D1 的区别。

2、Milliplex多因子检测技术在细胞凋亡研究中的应用：
       细胞凋亡与肿瘤，神经退行性疾病（阿尔兹海默症/帕金森病），自身免疫性疾病（类风湿关节炎，多发性硬化和I型糖尿病）以及代谢性疾病，心血管疾病等息息相关。一直是科研工作者研究的热门领域。 

       在目前凋亡研究中，IHC, WB, ELISA等常用检测方法都是对凋亡相关因子进行单指标检测，无法对凋亡通路进行完整的分析。而默克密理博今年新上市的Milliplex多因子检测试剂盒却为凋亡通路的整体研究提供了可能。

图2：茴香霉素，紫杉醇或喜树碱处理白血病细胞Jurkat 和人肺癌细胞A549, 进行多重检测分析。宫颈癌细胞HeLa（λ-磷酸酶处理）作为阴性对照，从结果来看，茴香霉素能够刺激Caspase-9（内源性凋亡）和JNK 相关的Jurkat 细胞早期凋亡，而紫杉醇中Bcl-2 和Akt 的高表达显示了Jurkat 细胞对紫杉醇不敏感。喜树碱则明显能够抑制A549 细胞增殖，因此样本处理：25μM 茴香霉素处理白血病细胞Jurkat （4 小时）或5μM 紫杉醇（过夜），5μM喜树碱处理A549 细胞（过夜）。处理后用含蛋白酶抑制剂的MILLIPLEX^® MAP 裂解液裂解细胞。20μg 的总蛋白用MILLIPLEX^® MAP 检测“Assay Buffer2”稀释，实验过程依照产品说明书。（裂解液4o℃孵育过夜）。用Luminex^® 系统检测平均荧光强度（MFI）。结果表示是三次重复实验的平均值和标准偏差。

3、Milliplex多因子检测技术在肿瘤转移研究中的应用：
       肿瘤转移是一个复杂的过程，往往与多种细胞因子和趋化因子相关。默克密理博新推出的人癌细胞转移试剂盒利用生物标志物（Biomarker）对多种肿瘤转移进行检测。有助于癌细胞转移的早期发现，对肿瘤治疗效果及预后进行评价。 
       人癌细胞转移试剂盒(Cat.# HCMBMAG-22K)可以同时对肿瘤转移相关的 9个因子同时进行绝对定量检测，zei高检测灵敏度可达0.3pg/ml，大大提高了肿瘤转移检测的精确性和灵敏性。 

正常样品与肿瘤样品的对比。肿瘤样本包含了从不同治疗患者上取得的不同阶段的肿瘤。

正常样品与肿瘤样品的对比。肿瘤样本包含了从不同治疗患者上取得的不同阶段的肿瘤。