ISET循环肿瘤细胞捕获仪-高灵敏诊断性检测循环肿瘤细胞

ISET循环肿瘤细胞捕获仪特点

ISET@技术（肿瘤细胞尺寸分离）是一种简便易用的方法，由Rarecells Diagnostics 提供。该系统（装置和耗材）灵敏度非常高，可以从血液中提取含量稀少的循环肿瘤细胞（CTC）和循环肿瘤微栓（CTM），同时保持形态和结构完好无损。可以对完好的CTC/CTM 进行进一步的体外诊断检查（例如细胞病理学和/或免疫标记、遗传学和分子学DNA 和RNA 分析等其它鉴定方法）。

ISET@方法的原理基于一项事实，血细胞是人体中最小的细胞。通过独创的zl过滤工艺，ISET@可以分离CTC，因为CTC 大于其它血细胞（根据细胞病理学诊断准则），与表达出的抗原无关。分离出的CTC 完好无损。

创新

从血液中无偏差地、快速高效地分离出完好无损的CTC，适用于所有的癌症类型。该系统与抗体（EpCAM、细胞角蛋白）无关，可以识别所有的CTC 类型，避免错误的阳性和阴性结果。

灵敏度极高
全血过滤和无损CTC 分离，灵敏度非常高，达到1 毫升血液1个CTC，也就是说，在95%以上的情况下，1 个CTC 与大约1000万个白细胞和50 亿个红细胞混合在一起。

高质量
高质量的血液过滤，不需要其它的步骤。其它血液过滤方法无法比拟。采用30 项zl参数，这些参数对于工作性能来说十分重要。经过了严格的质量控制测试 。

富集能力
富集能力极高，与CTC/CTM 一起提取出的非肿瘤细胞数量非常少。分离上皮和间质CTC/CTM，精确统计每毫升血液中的数量。提取固定和非固定（鲜活）细胞，灵敏度非常高。

科学界认可
受到众多独立研究团体的认可，发表在30 多家研究刊物上。经过验证，是与细胞病理学诊断法相容的CTC 鉴定产品。

CTC保存方便
CTC以传统的载玻片方式保存。分离后，CTC可以在ISET@过滤件上保存至少7年，以便建立CTC 和CTM 生物样本库。

方便可靠
对于所有类型的血液样品均非常安全和高效。根据血液的过滤阻力（由于血液特性存在差异，在临床上会有所变化），可以调整负压，同时不会改变细胞的形态。

细胞病理学诊断
采用ISET@技术分离出的CTC/CTM 完好无损，结构没有改变。病理学家可以判断是否存在CTC/CTM，把它们与其它稀少细胞区分开， 并鉴定CTC/CTM 的性质。

应用灵活
可以同时处理不同的血液体积（从10 微升到10 毫升）或不同的样品。适用于多组重复检测（ 对同一份样品进行多重分析）。适用于所有类型的癌症（慢性淋巴细胞白血病除外）。

免疫分子学鉴定
通过免疫学、DNA 和RNA 分子学分析，可以全面鉴定由ISET@系统分离出的CTC（原发器官、侵入性、DNA 变异、RNA 变异、表观遗传改变）。

ISET方法

ISET@方法的成功来自于Rarecells@装置、缓冲剂和模块的使用。这些产品一起使用，确保了高效的血液过滤，同时不会影响细胞形态。使用缓冲剂以1:10 的比例稀释血液，使血液适合过滤。在轻柔搅拌条件下培养10 分钟后，把血液转移到Rarecells@模块中。Rarecells@模块含有过滤件，位于Rarecells@装置上。Rarecells@装置在3 分钟之内，把CTC/CTM 富集在膜片上。必须在采集当天对血液进行处理。ISET@与所有常用的肿瘤细胞鉴定方法相容，包括：细胞病理学和免疫染色法、FISH 法、分子学分析法等。Rarecells@系统是一种开放的方法，可以与不同的“工作流程”结合，用于不同的应用领域。

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ISET循环肿瘤细胞捕获仪临床诊断特异性

对于由ISET@分离出的细胞，其细胞病理学分析具有诊断特异性。一个由10 位病理学家组成的团队已经验证了这一点。他们采用盲法分析了经过ISET@处理的770 份血液样品，其中569 份样品来自患有不同类型癌症（处于不同阶段）的患者，201份样品来自健康受试者（Hofman等，美国临床病理学杂志，2011年）。该研究证明，目前用于脱落细胞病理学以及细针活检和PAP 检测的标准细胞病理学准则（细胞尺寸、核质比例、核轮廓和染色质不规则性等），也适用于诊断采用ISET@从血液中提取的CTC。该研究还确认，如果存在甲状腺腺瘤和甲状旁腺腺瘤，则细胞病理学分析不具有诊断性，这符合细胞病理学领域的现有知识。

采用免疫标记法可以进一步研究由ISET@分离出的CTC，把它们与其它“稀少细胞”（内皮细胞、巨核细胞等）区分开。
采用ISET@技术分离出的循环肿瘤细胞，经过细胞病理学诊断后，被称为CCC（循环癌细胞）。

Rarecells@装置

高效过滤各种类型的血液样品和其它体液

Rarecells@缓冲剂
Rarecells@缓冲剂用于血液稀释，可以溶解红血球，同时不损伤CTC/CTM。
缓冲剂在提供时呈粉末状，可以直接稀释和混合。
在使用之前，把甲醛添加到缓冲剂中，以固定大细胞的细胞骨架。

Rare cells@模块

Rarecells@模块是一次性使用耗材，可以插入Rarecells装置中。该模块用于分配10 毫升血液，采用Rarecells@缓冲剂以1:10的比例稀释（因此稀释血液的体积为100毫升），用于标准用途。通过10 个圆形的过滤区域（圆点）过滤稀释血液。过滤后，每个圆点中含有相当于过滤之前1 毫升血液中的大细胞。

总体特性

样品类型：血液和所有其它类型的体液，骨髓除外。

物种：人、小鼠、大鼠。

可过滤的血液体积：从10 微升到10 毫升。

固定细胞和鲜活细胞分离：两种均可，方案和缓冲剂不同。

CTM分离：可以。

癌症类型，带已发表的数据：肝癌、乳腺癌、前列腺癌、结肠直肠癌、肾癌、头颈部癌、胰腺癌、肺癌（非小细胞和小细胞肺癌）、恶性肿瘤、皮肤黑色素瘤、葡萄膜黑色素瘤

下游分析可能性：细胞病理学染色（MGG、HE、巴氏染色）、免疫染色（细胞角蛋白、波形蛋白等）、FISH（EML -ALK 、HER2 等）、分子学分析（KRAS、EGFR、BRAF、NGS 等）

处理时间：每份样品大约15 分钟。红血球溶解：10 分钟，过滤：2-3 分钟，冲洗和从模块中取出过滤件：1-2 分钟

从抽血到处理的时间：应尽可能快地进行处理，因为CTC 在血液中不稳定。血液不能在未经处理的情况下放置过夜。

分析性能
Rarecell@系统本身不具有诊断能力。该系统的作用是分离稀少细胞，以便通过后续分析进行高效的诊断

准确性-相对于基准或标准的测量正确性
c采用多种细胞系对系统的体外检测准确性进行了评估，并发表了结果。这些细胞系包括：HepG2、LNCaP、MCF-7、H1299（Vona等，2000，美国病理学杂志；Krebs 等，2011，胸部肿瘤学杂志）、A549、HeLa、H228、A375、PC3（未发表的数据）

精确度-运行周期之内 不同的运行、批次、仪表、日期、地点之间
不同的独立的团队报道了ISET@系统的体外检测的可重复性和可复制性。（Vona等，2000 ，美国病理学杂志；Krebs 等，2011，胸部肿瘤学杂志）

灵敏性-可以检测出的最小数量
在95%以上的情况下，ISET@系统可以检测出1 毫升血液中的单个肿瘤细胞（检测限值：1 毫升血液中1 个肿瘤细胞）。（Vona等，2000，美国病理学杂志；Krebs等，2011，胸部肿瘤学杂志）

特异性-检测特定要素并避免交叉检测的能力
ISET@从血液中提取肿瘤细胞，并保持细胞完好无损，以便进行后续的诊断性细胞病理学分析或其它免疫分子学分析。这两种分析均具有诊断特异性。