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光片照明显微镜-Lattice LightSheet

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3i生物显微镜, 活细胞研究用时空超分辨率和单分子灵敏度层光显微镜系统 该显微镜由霍华德.休斯顿医学研究所Janelia研究园区的诺贝尔......

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技术特点
【技术特点】-- 光片照明显微镜-Lattice LightSheet


活细胞研究用时空超分辨率和单分子灵敏度层光显微镜系统  该显微镜由霍华德.休斯顿医学研究所Janelia研究园区的诺贝尔奖获得者Eric Betzig博士发明,被应用到生物系统,跨越了空间和时间的四个数量级。一个高灵敏度的初始物镜加上定制设计的照明系统,允许光学切片使用极低的光剂量并以前所未有的持续时间来进行成像。3D实验之前受限于光毒性,现可以连续监测数小时或数天。高时空分辨率,高速度和高灵敏度的结合使晶格层光成为活细胞显微镜新时代的终极工具。

产品特点:

1. 光毒性减少,轴向分辨率增加2倍
常规的光束产生的是高斯光束,太厚超过细胞直径,只能允许亚细胞成像。无衍射光束穿过成像区域,产生一种亚微米厚度的虚拟光束,非常适用于无创的高速4D成像。
光毒性和光漂白 10倍~20倍减少
通过发散多个低强度超薄、无衍射光束穿过一片广泛的区域,在任意单一平面的强度都被降低,并且非线性光损伤机制的影响缩至zei小。
2. 常规标本准备
标本被培养或安装在一个直径为5毫米的盖玻片上。无需特殊染料或标本处理。标本放置装置具有输入和输出端口,用于灌注加热或冷却介质。
3. 相对于旋转盘共聚焦显微镜,速度提升20倍
高轴向和时间分辨率同时实现- 这是无论旋转盘共聚焦或者高斯光束都无法实现的范例。



    荧光显微镜自发明以来一直是生命科学中举足轻重的表征手段。它出众的信噪比不但能提供样品的结构性成像,更因为荧光染料的特异性标记可对样品进行功能性成像。

然而荧光成像也有着难以避免的缺点,那就是荧光漂白现象。在荧光成像时为了产生足够的荧光信号。目微镜不可避免的要给予样品足够强度的激发光照射。而这正是导致荧光漂白的罪魁祸首。无论使用哪种光源,传统的荧光显微镜都能在数分钟产生足够的荧光漂白,使信噪比下降到无法正常观察的程度。这就极大的限制了长时间观察样品的可能性。

减少光漂白的关键在于如何更有效率的利用激发光强度,避免无效的荧光信号产生,对样品造成无意义的伤害。在传统的宽场显微镜成像时,虽然显微镜只是对物镜焦面(focal plane)进行成像,整个样品都会被激发光点亮。这时焦面的上方和下方都会产生信号,这不但极大的增加了光漂白,更严重的是宽场显微镜无法限制这些信号进入检测器,使得在对厚样品成像时无法做到层切成像,更无法实现对样品的三维重构。共聚焦显微镜的发明显著了改善了宽场显微镜3D成像功能的缺失。它使用与物镜焦点共轭的针孔将离焦的信号几乎都挡在检测器外,实现了层切扫描功能。虽然共聚焦显微镜能利用针孔挡住离焦信号,但这些信号依然是存在的并会产生大量的光漂白。


Lattice LightSheet Microscope晶格光片显微镜更是使用了晶格贝塞尔光作为光源,在与传统的使用高斯光作为光源的光片显微镜相比,在同样的视野大小下光片的厚度薄了10倍,光漂白自然也进一步得到了极大的改善。为此Eric Betzig的这个设计多次登上了SCIENCE杂志的封面文章。

 3i (Intelligent Imaging Innovations)致力于设计和制造先进的活细胞和活体显微镜成像平台, 其针对活细胞进行3D显微成像,成像速度快(实时观察细胞动态),光毒性小(不影响细胞的正常生长),分辨率高(高分辨才能观察细胞内精细的结构变化)。




【技术特点对用户带来的好处】-- 光片照明显微镜-Lattice LightSheet


【典型应用举例】-- 光片照明显微镜-Lattice LightSheet


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