cell FRAP/cell TIRF细胞全内反射及光操控技术 活细胞工作站

参考招标参数：河北医科大学本科高校综合水平提升经费—高水平大学和重点学科建设经费设备采购0621-1840HBT20057/001-009

包四：光操作成像系统

1 研究级电动倒置显微镜

1.1电动倒置显微镜，双层光路，包括电动Z轴、电动物镜转盘、电动聚光镜、电动荧光激发块转盘、电动DIC环板切换等；可通过电容式触摸屏控制器、软件、手动三种方式控制

*1.2电动控制Z轴，Z轴步进精度≤10nm

*1.3 电动激发块转盘≥8孔，内置电动光闸，防水设计；荧光激发块包含4个：带通紫外荧光激发块、带通蓝色荧光激发、带通绿色荧光激发块；FRAP激光用激发块激发块，安装于荧光激发转盘中

1.4 荧光光源：130W长寿命荧光光源，灯泡寿命≥2000小时，7档调光

1.5 电动长工作距离聚光镜：具有5孔位，N.A.≥0.55，W.D.≥27mm

*1.6 高分辨率TIRF物镜：100X TIRF油镜，N.A.≥1.49，W.D.≥0.1mm

1.7 明场观察附件：全套微分干涉（DIC）附件

1.8 精确定位功能载物台，具备XY锁定和复位功能；移动范围Y≥75mm，X≥114mm

1.9 透射光照明：100W卤素灯透射光照明装置，视场可变光阑可调

1.10  万能复消色差物镜：10X（N.A.≥0.3, W.D.≥10mm）40X（N.A.≥0.95, W.D.≥0.18mm）

2自动FRAP光路系统

*2.1 原厂激光系统：405nm 固体激光器，功率≥50mw

*2.2 可以电动调节的光操作模块的临界角，可自由漂白视野中的任意形状，任意位置

*2.3 FRAP实验拍摄图片以及激光操作控制等功能均通过实验管理界面控制实现。可以自动延时成像；通过鼠标划定图像上的位置，进行自动的漂白操作，可以实时成像观察

3 sCMOS科研级摄像头

*3.1  140 万像素背照式sCMOS 芯片，像元尺寸11 x 11 微米，对角线尺寸≥18mm

*3.2 量子效率（QE）峰值≥93%

3.3 预览速度：≥80fps@全幅

3.4单像素线性满阱容量不低于80,000e-

*3.5 半导体制冷，同时具备空气循环和液体循环两种散热方法：空气循环散热下制冷致恒温零下10度，液体循环散热下制冷致恒温零下25度

4 显微图像控制及分析软件

4.1 可以对图像中的灰度强度变化进行分析统计，从而反映图像中的变化特性；在图像上添加注释、箭头等功能，可以方便的表示图像中的重点关注部位

*4.2可以进行荧光图像光谱拆分，荧光共定位分析

4.3 对各通道图片做色彩合成，方便显示多染标本的图像；输入硬件信息即可实现添加标尺功能，从而显示图像的放大比例关系；

*4.4获取多通道荧光图像，获取多维图像，可达5维图像

*4.5 可实时对不同Z轴平面图像进行景深扩展，实时获取多层面的清晰图像；提供三种反卷积算法，包括近邻法、非近邻法、Wiener滤镜

4.6 可以提供报告模板，进行图文并茂的报告输出

4.7 实验编辑功能（Experiment manager）可以控制周边硬件高速获取图像并进行同步的相关分析。可以进行多通道荧光自动获取，多维显微成像控制：X, Y, Z, T,等多维控制，实现多时间、多标荧光、Z序列的自动采集和处理

4.8 可以手动和自动随意对图象切割、测量、计数、分类；HE等染色方法的阳性灰度、阳性比例计算、荧光强度分析等。可以选择面积、周长、角度等50多种测量方式，所有的测量结果可以导出到EXCEL表格，以便进行后期的其他分析和存档等

*4.9 荧光漂白后恢复（FRAP）效率分析：获取和分析原始的FRAP曲线和根据原始曲线提供的参数得到的拟合曲线。zei后的输出包含制成表格的拟合参数（恢复的速率常数）

4.10 FRET模块：获取和分析使用Youvan方法、Gordon方法和Xia方法的敏化发射以及受体光漂白FRET

4.11 图像工作站：Windows 7；内存≥8G；DVD-RW；硬盘≥1000GB；30英寸液晶显示器系统（2560X1600）

跨入21世纪，对于活细胞和组织的全方位研究成为推动细胞生物学、神经生物学、发育生物学等zei活跃生命学科研究的强大引擎。奥林巴斯zei新活细胞成像系统可以提供自由的多维活细胞图像采集、控制、分析等强大功能；可以充分保证整个活细胞采集过程中光学、电学、温度、湿度、PH值等多个条件的高度协调和稳定；并在活细胞拍摄过程中保持高清晰、高反差和高速度的成像效果；充分体现了维持细胞生命活性与获得完美活细胞图像的和谐统一。 

延时序列成像（Time-lapse）

时间序列成像主要用于自动采集活细胞随时间变化的图像。适用于拍摄细胞生长、新陈代谢、神经传递、信号传导等细胞生理和动态信号的观察，拍摄的间隔时间从毫秒级到小时甚至于数天。Olympus新活细胞系统具备方便灵活的互动式图形化界面，可以实现从快速拍摄到长时间延时成像实验的高细胞活性和高信噪比成像，并行控制方式实现多硬件快速协调的工作。

多通道荧光图像采集（Multi-Color）

对多标的样品，通过获取多通道荧光图像，可以清楚地区别标记了不同荧光的亚细胞结构。同延时序列成像实验一起，可以记录到多色荧光信号的动态变化过程。MT-20提供快速切换波长的激发光源，实现高速多色成像。

多维图像获取（Multi-Dimensions）

自动采集样本空间多维影像，适用于形态学空间定位研究、空间三维测量等。配合超高精度高速度的压电Z轴，可以记录快速的空间动态变化，如细胞空间生长变化和离子空间分布变化等。通过适配其它电动部件，可以一次实验完成多处理、多位置、多时间点的全部采集，极大降低了人工操作的复杂性，保证了实验条件的一致。

选配转盘式扫描共聚焦DSU系统，可以搭配成理想的电动3D层叠图像分析系统，实现自由选择荧光标记的高光通量共聚焦系统。

离子比例图像获取（Ratio）

离子比例测定系统通过比较荧光染料在不同激发或发射波段下的不同变化。可以有效地屏蔽系统造成的背景影响，增加信号采集敏感性，并且测量结果不受染料浓度和荧光漂白影响。更重要的是可以使用比例离子测定的方法进行离子定量研究。该类实验可以鉴定活细胞中钙离子的空间分布差异、测量胞内PH值和监控离子浓度随时间的变化等。Olympus新的活细胞系统使用快速单色仪光源，高速采集Ratio图像，可进行图像背景和荧光光源的校正，并实时显示动态变化曲线。

全内反射荧光图像获取（TIRFM）

TIRFM系统将全反射荧光技术与传统的落射荧光技术、明场透射照明技术有效地结合在一起，能消除来自细胞体的荧光，提高了荧光图像的信噪比，被广泛应用在生物和化学领域，用来观察100nm深度附近的细胞膜表面甚至是单分子荧光。

该套全新的TIRFM系统使用多接口接入模式，自动控制临界角设定，各激发波长独立引入、独立调整，可以安装4个激光器，选配多达8个谱线，能够同时获取四色TIRF荧光成像。配合MT-20光源，在TIRFM成像和常规宽场荧光观察之间切换非常简单。 

可选配件

电动载物台

应用高速电动扫描平台可以对培养皿和多孔板等容器进行多点的延时摄影实验，能够非常精确的定位到预先设定的位置。通过预设的程序控制，载物台可以自动有效的定位拍照多孔板内的多组细胞。载物台上的样品可以通过软件或者通过控制手柄进行平滑的控制。

高精度压电控制Z轴

纳米级压电控制Z轴，具有极高的速度、精确性和平滑性，是活细胞快速三维图像获取的理想选择。此纳米电动Z轴适配所有物镜；超高的精度和速度可以用于极快速变化三维结构的实时图像采集，捕捉极快速的三维结构改变。

细胞生长环境控制系统

在进行活细胞观察过程中，尤其是进行活细胞的长时间观察（如长时间Time-Lapse）时，不仅要使细胞保持存活，还要维持细胞的正常活性，以便观察到细胞、细胞器或相关蛋白的变化过程和空间分布。这就需要控制细胞环境处于zei适合的状态。奥林巴斯提供了多款细胞培养器，能够维持培养细胞的温度、湿度、PH值等相关条件，使细胞长时间处于正常活性状态。并且提供了多款控制器，可以指示和调控各层加热的温度，内置CO2气体混合器或气体流量计，可以根据需要选择适用5%CO2或者100%CO2气瓶。

零漂移补偿系统ZDC

为了避免由于热漂移导致的离焦，我们推出了零漂移系统。该系统采用近红外光监测，不影响成像质量，也不会对样品造成损害，能够长时间监测细胞位置，保持焦面位置始终不变。适用于显微镜下细胞的长时间培养和实时观察、时间序列图像的摄影以及细胞发育和分裂的状态观察。