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布鲁克 LC-SPE NMR 联用

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布鲁克核磁共振波谱仪, 联用技术领域的zei新发展是使用固相萃取 (SPE) 系统作为液相色谱 (LC) 与 NMR 之间的接口;在LC-SPE NMR 过程中,色谱仪完成分离,相应的峰则被一一固定在色谱柱后的固相萃取柱上。峰选择是通过 UV 检测器或通过在线的 MS 或 MSn 谱图完成。

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固相萃取 (SPE) 系统 

联用技术领域的zei新发展

 

联用技术领域的zei新发展是使用固相萃取 (SPE) 系统作为液相色谱 (LC) 与 NMR 之间的接口。

 

循环收集和转移(BPSU-36/2)是 LC-NMR 中常用的分析技术。但是,样品是在色谱系统提供的原始洗脱液和浓度状态下进行测量的。(质子化的)洗脱液对有限进样量导致的低浓度样品的干扰是无法避免的。

 

在LC-SPE NMR 过程中,色谱仪完成分离,相应的峰则被一一固定在色谱柱后的固相萃取柱上。 

峰选择是通过 UV 检测器或通过在线的 MS 或 MSn 谱图完成。被固定的色谱峰样品可进行 NMR 测量(洗涤、干澡 ...),NMR 波谱仪配备了一个特殊的流动探头,并通过毛细管连接到固相萃取系统。色谱峰样品借助适当的(氚代)溶剂通过毛细管直接流入 NMR 探头。


特点 

色谱分离可以借用廉价的非氚代溶剂,甚至是与 NMR 波谱不兼容的添加剂
由于洗脱剂中没有D2O ,色谱分离过程中就没有 H-D 交换产生,从而能够获得正确的质量信息

 

转移仅需要小量(大约 300 微升)氚代溶剂。

 

完整样品是被固相萃取柱中的少量体积的(小于 30 微升)液体洗脱的。由于这种富集效应,检测灵敏度增加 2 至 4 倍,尤其是对于更宽的峰而言这种效果更好。
通过色谱分离后的相同样品的多次富集,样品量和浓度会进一步增加,灵敏度能够提高 10 倍或以上。

 

于洗脱和转移的氚代溶剂不受色谱条件的影响,可以提高谱图质量,能够在 NMR 观察到可交换质子。

 

对于此类型的分析,布鲁克公司现在提供一个完整的 SPE-NMR 系统。该系统包括:
布鲁克∕Spark Prospekt II 固相萃取系统。

 

HyStar 软件包,在自动化条件下控制整个流程。

 

流动 NMR 探针,其检测容量可根据样品洗脱峰的体积进行调整。

 

这种新系统为 LC 和 NMR 的联用打开了新局面:

 

对浓度要求较高的 LC-NMR 的异核实验之前仅可能在有限的案例中进行,但是现在已经成为标准实验。

 

HSQC 和 HMBC 等类型实验使得利用 LC-(SPE) NMR 进行完全未知物的结构鉴定成为现实,这项技术可以用于诸如植物提取物的筛选。

 

鉴于 LC-NMR 主要用在场强为 500 MHz 和更高的磁场,借助 SPE,LC 和 NMR 的联用在较低强度磁场的应用前景更为广阔。


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