Rotofor® 和小型 Rotofor 电泳槽使用液相 IEF 在单体溶液中将蛋白质分为 20 个组分。 在最初的纯化步骤中,这些细胞会聚集蛋白质并消除相关 pI 范围以外的蛋白质。 在最后一个纯化步骤中,将消除可能难以通过其他方式去除的蛋白质污染物。
由于它可以处理高达克量级的蛋白质并将蛋白质有效浓缩到基于 pI 的离散区,因此 Rotofor 是一种经过证实的、有效的低丰度蛋白浓缩方法。 在单次运行中,Rotofor Cell 最多可将样本浓缩 20 倍;还可以将所选分部在 Mini Rotofor 或 MicroRotofor Cell 中合并和重新进行分级分离,以获得更大程度的纯化。 在双向电泳应用中,按 pI 进行的蛋白质分级分离可去除感兴趣的 PH 区域外部的蛋白质,从而改进下游样本加载以及窄幅和微幅 IPG 胶条上的分离。
Rotofor(60 ml 聚焦槽)和 Mini Rotofor(18 ml 聚焦槽)电泳槽实际上是同一系统的不同配置,设计为容纳不同的样品。 两者的特征如下:
可互换的圆柱形聚焦槽 — 实现所选分部的重新分级分离,以获得更高级的纯化
保持生物活性
自定义 pH 梯度 — 可使用 Bio-Lyte 两性电解质生成较宽或较窄的线性 pH 梯度
一步将感兴趣的蛋白质聚焦和浓缩成 1 或 2 个分部
Mini Rotofor 槽 | Rotofor 槽 | |
组分数 | 20 | 20 |
样品体积 | 18 ml | 35–60 ml |
组分体积 | 0.7 ml | 1.75–3 ml |
样品加载 | 微克到毫克 | 毫克到克 |
运行 Rotofor 和小型 Rotofor 聚焦仪所需的附件包括:3,000 V 电源(例如 PowerPac™ HV)、冷却循环器、真空源;另外需要使用 Bio-Lyte® 两性电解质形成pH梯度。
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