OROBOROS O2K细胞能量代谢分析系统

OROBOROS O2K细胞能量代谢分析系统

       Oroboros O2k是目前国际极具认可度的细胞能量代谢测量/分析产品。

O2k系统通过高分辨率的极谱氧电极和全功能的荧光技术实现对样本的线粒体呼吸功能以及生物体的能量代谢进行精 准 定量及分析。

O2k已经成为国际线粒体研究的标准，其应用范围几乎涉及所有与细胞或线粒体能量代谢相关的领域。

多功能参数检测：可同时检测耗氧率、呼吸速率、呼吸控制比率、PH值、膜电位、离子浓度、自由基、ROS、ATP、Ca2+、NO。

多种样品适用：可用于直接测量线粒体、细胞、组织器官，或者细菌、植物细胞等。

性能特点：

双通道系统

测量样本容量1.5ml-3.5ml

温度范围：4-47℃，可进行低温试验

具有可变速的磁力搅拌功能

极谱氧电极传感器，检测氧流量分辨率为1 pmol O2?s-1?ml-1

荧光检测单元：双通道/四通道。

荧光检测参数包括：线粒体膜电位、H2O2、ATP、Ca、Mg离子。

样品仓为杜兰玻璃、钛金属等极低活性的材质，减少低背景氧干扰。

同步显示流动氧的浓度；自动进行氧信号的校正。

双通道微量注射泵，具有注射和回抽的功能，自动化控制，可在软件的编程下进行定时定量的精准加样，不限制加样次数。

专用组织匀浆工具，采用匀浆管技术对样本进行研磨，样本需求量少至几毫克。

可自由设计实验，根据实验设计实时的加入不同的底物、抑制剂等化合物去改变线粒体的呼吸，不限加药次数。

强大的DatLab软件功能：可实时显示并记录所有测量参数；可在实验过程中随时更改实验设计；可自动进行氧气等参数的校准；具有Protocol编程功能，支持客户自定义编程以便重复实验，同时厂家提供多种Protocol程序，方便客户选用。

Oroboros O2K技术优势：

高精度电极检测方法

实验使用试剂开放，无实验耗材消耗

封闭性检测环境，可进行低氧/常氧/高氧实验

拥有加热/制冷模块，可实现电子控温，温度精度高

精准定量检测方式，直接检测样本消耗pmol O2  的含量

具有搅拌系统的检测腔，确保腔室内样本溶液均匀，可提高检测样本的准确性和实验重复性]

Oroboros O2K采用模块化结构特点，更灵活地满足不同研究方向的使用需求，节约了购买成本 。

产品型号：

O2k-FluoRespirometer（含荧光检测系统）

O2k-Respirometer (不含荧光检测系统）

应用演示：

实验利用寡霉素抑制细胞氧化磷酸化而降低耗氧率的方法，使细胞呼吸达到Leak水平；实验第30分钟开始加入5uM解偶联剂，并每间隔120秒逐量增加0.5uM，实验数据结果显示，O₂含量呈逐步下降趋势，耗氧率随解偶联剂的浓度上升而增强，达到最 大 耗 氧 率。

实验样本为不同量的人类股外侧肌组织，将样本A 3.4mgW_w与样本B3.4mgW_w 置于双通道的细胞代谢测量分析系统中，分别加入苹果酸、辛酰肉碱、ADP、谷氨酸、琥珀酸、鱼藤酮、丙二酸、粘噻唑、以及抗霉素等，观察细胞的耗氧率情况，进而了解细胞的能量代谢机制。红色曲线为样本A，绿色曲线为样本B，实验数据显示不同量样本加入相同剂量的药物后耗氧率变化相同。

测量细胞为小鼠骨髓癌细胞，实验中使用TIP 2k微型滴定泵加入FCCP，实验设定滴定间隔120秒，循环滴定15次，加药浓度从0.5uM-7.5uM。O₂含量逐步下降，耗氧率随解耦联剂FCCP的不同浓度的变化而不同。

实验为测量小鼠心肌细胞的耗氧率与H₂O₂之间的相互作用。实验中分别添加活性氧、琥珀酸盐、谷氨酸、ADP、寡霉素、FCCP以及细胞色素C，实验设置为不同实验样本中加入药物的剂量相同，但顺序不同，实验数据显示不同的药物添加顺序对细胞代谢、氧化磷酸化过程产生了不同的影响。

参考文献：

Bajzikova M, Kovarova J, Coelho AR, Boukalova S, et al. Reactivation of dihydroorotate dehydrogenase-driven pyrimidine biosynthesis restores tumor growth of respiration-deficient cancer cells. Cell Metab 29:399-416.

Rodríguez-Nuevo A, Díaz-Ramos A, Noguera E, et al.  Mitochondrial DNA and TLR9 drive muscle inflammation upon Opa1 deficiency. EMBO J 37.

Bhaskaran S, Pharaoh G, Ranjit R,et al. Loss of mitochondrial protease ClpP protects mice from diet-induced obesity and insulin resistance. EMBO Rep 19. pii: e45009.

Mills EL, Ryan DG, Prag HA, Dikovskaya D, et al. Itaconate is an anti-inflammatory metabolite that activates Nrf2 via alkylation of KEAP1. Nature 556:113-7.

Calcutt NA, Smith DR, Frizzi K, Sabbir MG, et al. Selective antagonism of muscarinic receptors is neuroprotective in peripheral neuropathy. J Clin Invest 127:608-22.