Axon Axoporator 800A单细胞电穿孔仪

Axon 800A 单细胞电穿孔仪

Axoporator™ 800A 电穿孔仪，是世界上第一个商品化的单细胞电穿孔器，集中了生物物理学、细胞生物学以及分子生物学。这种以微量移液器为基础的输送系统使用电压脉冲暂时形成细胞膜孔，可以流过微量分子和/或离子。该装置与悬浮细胞大量电穿孔所使用的一样；通过电压脉冲使细胞膜的电介质破裂；但是单细胞的电穿孔与大量细胞同时电穿孔相比具有明显的优势:

• 单个细胞可以进行具体的修改。无论您是否正在使用隔离的细胞，组织切片或者完整无缺的标本，这种技术使您可以只专注于单个细胞。

• 细胞的精确区域可以有选择性的进行目标定位。顶部或者底部、神经突或者轴突、动物极与植物极-单细胞电穿孔使您在研究时只专注于细胞的具体区域。大型的、隔离的以及完整无缺的细胞器也适用于单细胞电穿孔。

• 电穿孔只需要微小的体积。这有助于保护昂贵的和稀少的分子。.

• 非常高的存活率，平均达80%。细胞可以较好的承受干预因为只有一小部分细胞膜与电压发送的微量移液器有关。因此细胞可以使用不同的基因进行不止一次的电穿孔。

成功案例记录

Axoporator 800A电穿孔仪随着单细胞电穿孔前辈们的建议以及测试而不断发展。这些成功的协议都编成了文件放在用户手册以及Axoporator 800A的应用注释中。

Axoporator 800A电穿孔器融合了Axon经过时间证明的两个强项：膜片钳技术和精确的波长生成。液晶显示屏、按钮和把手就组成了直观的用户界面。所有的脉冲和培训设置以及吸液管电阻和功率读数值在液晶显示器上都可以显示出来。如果需要的话，微量移液器的电压和电流也可以从BNC连接器上进行记录。提供了三种不同的脉冲类型，三种都可以以任何极性或者以任何顺序进行运行，这些包括：

• 矩形 ''''方块''''

• 双极

• 双相 — 一种特殊的脉冲，经证明可以有效并且有效率的将基因按照14千字节的速度输送到细胞中。

灵活的控制和设计

尽管其设计是用于方便的单独使用，但是外部的波长生成器，例如pCLAMP软件以及Digidata 1322A可以作为脉冲指令源。

一旦配置好， Axoporator 800A可以通过按下按钮一次而激活。作为选择，也可以通过脚踏开关或者是外部的触发装置（TTL）进行激活，从而可以使用两手控制显微镜以及显微操纵器。 同步输出的BNC也可以用于使可选择的记录系统进行同步。

根据我们的经验，研究者永远可以找到非传统的、聪明的方法来使用我们的产品。因此Axon具有灵活设计的惯例。Axoporator 800A将两个非常重要的特征整合到将来预计的应用中：

• 提供了一个“工厂型”输入，下载固件，按照发现进展的领域进行升级。.

• 电压范围扩大到100伏，因为单细胞电穿孔zei理想的电压在某些标本中可能是几个十几伏。

标准的AP-1A-1MU headstage可以通过zei大达100微安的电流。可选择的AP-1A-0.1MU headstage可以通过zei大达1豪安的电流。

更多便利

为了帮助定位微量移液器，内置音频监控器在您接近细胞并接触时可以改变音调。这个音频监控器和电阻显示一起，为在组织切片中盲目细胞搜索提供了一个有用的工具。

跟踪电穿孔数量的指令是快速的，因为有手动和自动两种计数器。

Axoporator的小脚使其非常容易定位在显微镜附近。

即装即用

不需要使用计算机。仅需显微镜、显微操纵器以及若干微量移液器即可构成完整的系统。

提供的附件
理论和操作指南
AP-1A-1MU headstage (或者在下定单的时候替换掉AP-1A-0.1MU)
SCE-1U细胞模型(可选择10兆欧/15兆欧)
一个HL-U电极夹持器
一个安装杆
脚踏开关
接地附件

订购信息
Axoporator 800A

• 包括一台AP-1A-1MU 探头，可选择AP-1A-0.1MU 探头在订购时进行替换

Axoporator 800A

世界上第一款商用单细胞电穿孔仪， 代表着生物物理学、细胞生物学和分子生物学的整合应用。

概览

Axoporator® 800A 电穿孔系统是一款专用的单细胞电穿孔系统， 可对各个目标细胞进行单独电穿孔。提供精准的电压脉冲和脉冲串参数控制， 从而将离子或小分子zei佳定位传送到培养液、组织或体内的一组选定细胞中。

• 可立即使用。无需计算机。一台显微镜、一台显微操作仪和微吸管组套就构成一个完整系统。体积小巧， 可方便地放在显微镜旁边

• 三种不同脉冲， 可配置为任意一种极性， 确保为您的应用提供zei佳波形：

• 矩形“方波”

• 双极

• 双水平：一种特殊脉冲， 已证明能快捷有效地将zei大 14kb 的基因送达到细胞中

• 脉冲串， 为电压波形提供zei大灵活性

• 自动和手动计数仪简化对电穿孔命令次数的追踪。

• zei高 100V 的电压范围， 可为单细胞电穿孔提供zei佳电压， 在某些制备液中其电压可以达到几十伏。

• 配有 AP-1A-0.1MU 前置放大器 ， 电流通过范围zei高达到 ±100μA

• 内置音频监控器， 带有耳机连接器， 可在您接近并接触细胞时改变声音。

• 电阻显示， 结合音频监控器可在没有可视控制的情况下， 帮助用户在组织切片中有效地选中目标细胞

• 独立的或计算机控制的脉冲启动， 为电生理学实验提供zei大的灵活性和同步能力。详情请参阅“相关产品”部分。

• 脚踏开关， 可在双手忙于其它事务时触发脉冲启动

• 同步输出 BNC， 可同步第三方记录系统

• 用户指南， 由科学顾问在 Axon Instruments 工作人员的协助下编写， 以供初学者使用和作为深入参考

应用

电穿孔是分子生物学实验室用来向细胞引入极性或带电分子（如药物、蛋白质、肽或基因）的一种常用技术。Axoporator®800A 单细胞电穿孔系统代表了生物物理学、细胞生物学和分子生物学领域的融合。如果您已经在贵实验室进行电生理学记录或可视化实验， 那么您已经万事俱备， 可随时向现有装置添加 Axoporator 800A 电穿孔仪系统。

记录的成功方案

Axoporator 800A 电穿孔仪系统的开发吸取了单细胞电穿孔领域开拓者的建议， 并经过这些开拓者的测试。 他们的成功方案集收录在用户手册中。

电穿孔的细胞类型

已经被 Axoporator 800A 单细胞电穿孔系统进行过电穿孔的部分细胞类型记录如下。成功传送的化合物与每种细胞类型一并列出。

海兔神经元

• 加州海兔神经元和生长锥的电穿孔。Peter Lovell, Sami H. Jezzini, and Leonid L. Moroz. Journal of Neuroscience Methods Online

大鼠海马锥体神经元急性切片

• FITC 葡聚糖 3000

• 四甲基罗丹明葡聚糖3000

小鼠皮层神经元急性切片

• FITC 葡聚糖 3000

• 四甲基罗丹明葡聚糖3000

大鼠背根神经节细胞

• Alexa 488

• Alexa 568

• Clontech dsRed 1 线粒体克隆

• Clontech eGFP 过氧化物酶克隆

• 葡聚糖 FITC 4,10,20,40,70,250

海兔胃神经节

• FITC 葡聚糖 3000

大鼠视网膜神经节细胞

• Alexa 488

• Alexa 568

• Clontech dsRed 1 线粒体克隆

• Clontech eGFP 过氧化物酶克隆

• Clontech eCFP 核克隆

• 葡聚糖 FITC 4,10,20,40,70,250

大鼠光受体

• Alexa 488

• Alexa 568

斑马鱼视顶盖神经元

• pEGFP

• Alpha TN4 细胞（小鼠晶状体上皮克隆细胞系）

• Alexa 488

• Alexa 568

• Clontech dsRed 1 线粒体克隆

• Clontech eGFP 过氧化物酶克隆

• Clontech eCFP 核克隆

• 葡聚糖 FITC 4,10,20,40,70,250

• eGFP 波形蛋白

• eGFP 肌动蛋白

• eGFP Kir2.1 内向整流克隆

• eGFP Kv2.1 延迟整流克隆

• eGFP Bk α 亚基克隆

• 40 eGFP Kir2.1 部分序列克隆

• CaCl2

• 2,4-二硝基苯酚

• 细胞松弛素 D

• CD-20、衔接蛋白、高基氏、微管蛋白、内质网、核纤层蛋白 B 和溶酶体的 eGFP、eCFP、eYFP 或 dsRed 1 克隆

• 几种 siRNA

大鼠结膜上皮

• Alexa 488

大鼠睫状体上皮

• Alexa 488

大鼠晶状体上皮（经过胶原蛋白酶处理以去除囊膜）

• Alexa 488

• Alexa 568

大鼠角膜上皮

• Alexa 488

• Alexa 568

大鼠角膜上皮

• Alexa 488

人晶状体上皮（去囊膜制备）

• Alexa 488

• Alexa 568

人晶状体上皮（培养）

• Alexa 488

• Clontech eCFP 核克隆

• Clontech eYFP 过氧化物酶克隆

• Clontech dsRed1 线粒体克隆

• 葡聚糖 FITC 4,10,20,40,70,250

牛角膜上皮（培养）

• Alexa 488

• Clontech eCFP 核克隆

• Clontech eYFP 过氧化物酶克隆

• Clontech dsRed1 线粒体克隆

荷兰鼠 CAJAL 间质细胞

• Alexa 488

• Alexa 568

• Clontech dsRed1 线粒体克隆

• Clontech eGFP 过氧化物酶克隆

• 葡聚糖 FITC 4,10,20,40,70,250

软件

Axoporator® 800A 电穿孔仪系统为独立的一站式系统， 无需专用的控制软件。但是， 支持与单独提供的 pCLAMP 软件和 Digidata 1550B 数据采集系统配合使用。

引用次数*：82

zei近引用：
如需完整引用清单， 请点击此处。

Single-Cell Electroporation for In Vivo Imaging of Neuronal Morphology and Growth Dynamics

S Hossain, K Podgorski, K Haas - Neural Tracing Methods, 2015 - Springer

... We find that trains of short duration square pulses are effective, such as those produced
by common Grass Technologies SD9 stimulators or the Axoporator 800a from Molecular
Devices. An oscilloscope is useful to monitor pipette tip resistance. ...

In Vivo Study of Dynamics and Stability of Dendritic Spines on Olfactory Bulb Interneurons in Xenopus laevis Tadpoles

YB Huang, CR Hu, L Zhang, W Yin, B Hu - PloS one, 2015 - dx.plos.org

... interest. Dye was electroporated into neurons using 50 negative (positive for
dextran-conjugated dye) square 10–12 V pulses of 0.5 ms duration at a frequency
of 100 Hz generated by an Axoporator 800A (Axon Instruments, USA). ...

Single cell electroporation for longitudinal imaging of synaptic structure and function in the adult mouse neocortex in vivo

S Pagès, M Cane, J Randall, L Capello… - Frontiers in …, 2015 - ncbi.nlm.nih.gov

... For electroporation we used an Axoporator (800A) and a headstage (AP-1AX1MU, Molecular
Devices), attached to a micromanipulator (LN Junior, Luigs-Neumann) and positioned at an angle
of 30°. The target area was identified using the surface vascularization as a guide. ...

An improved chloride-conducting channelrhodopsin for light-induced inhibition of neuronal activity in vivo

J Wietek, R Beltramo, M Scanziani, P Hegemann… - Scientific …, 2015 - ncbi.nlm.nih.gov

... ascorbate, 0.02 Alexa Fluor 594, and 10 HEPES (pH 7.2). An Axoporator 800A
(Molecular Devices) was used to deliver 50 hyperpolarizing pulses (−12 mV, 0.5
ms) at 50 Hz. At DIV 18–20, targeted patch-clamp recordings of ...

* as of November 13, 2015. Source: Google Scholar.  Search results include “Axoporator 800A“ and “Axoporator Axon Instruments“.