胞异质性存在于生命医学研究的各个领域,包括肿瘤学,干细胞分化发育,免疫学等。重大生命医学问题的解决,必须首先解决细胞异质性的问题。
通过单细胞检测技术,对异质性细胞进行分类,是细胞异质性分析的主要手段。单细胞测序技术实在基因层面的单细胞分析,但是所有生物学效应,包括生理学效应,病理学效应,药物反应等,zei后都是通过特定蛋白质来发生和调控的。
Milo单细胞蛋白质表达定量分析系统,技术来源自美国著名大学加州大学伯克利分校Amy E. Herr教授实验室,该实验2014年原创性技术发表在Nature Method,题目Single cell western blot。ProteinSimple借助强大的软件及硬件研发实力,将其开发为单细胞蛋白质表达定量检测系统,用于细胞异质性及稀缺细胞样本(比如循环肿瘤细胞等)研究。
检测流程
Milo单细胞蛋白质定量表达分析系统,是第一款单细胞水平,蛋白质表达定量分析系统。Milo系统采用zl的微流控western blot芯片,通过单细胞微孔设计,采集单细胞,然后原位裂解细胞,释放蛋白,进行蛋白质电泳,将不同分子量蛋白进行分离,提高免疫学检测特异性。之后,采用zl技术进行蛋白质原位捕获,使用western blot验证抗体及荧光标记二抗直接杂交,扫描仪进行芯片扫描后,Scout软件对扫描结果进行深度定量分析。
因为Milo对单细胞蛋白质表达分析的独特优势,在7月份上市之后,连续获得了MIT technology review 年度创新奖,美国著名杂志 The Scientist 年度创新产品第一名。
Milo具有极其强大的功能:
1.单张芯片可进行1000-2000个单细胞westernblot检测
2.单个细胞可进行数十个靶蛋白检测
3.仅需使用westernblot验证抗体
4.基于westernblot技术,蛋白质分离后检测,提高免疫学检测特异性
5.全程检测4-6小时
6.适用于:细胞异质性研究及稀缺样本检测。
7.循环肿瘤细胞,外泌体检测
参考文献:
Microfluidic Western blotting,PNAS,December 26, 2012, vol. 109 ,no. 52,21450–21455
Single-Cell Western Blotting after Whole-Cell Imaging to Assess Cancer Chemotherapeutic Response, Anal. Chem. 2014, 86, 10429?10436
Single-cell western blotting,Nature methods,11, 749–755 (2014) doi:10.1038/nmeth.2992
Hydrogel Pore-Size Modulation for Enhanced Single-Cell Western Blotting,Adv. Mater. 2016, 28, 327 –334
Single cell–resolution western blotting,1508 | VOL.11 NO.8 | 2016 | Nature protocols
Profiling protein expression in circulating tumour cells using microfluidic western blotting, NATURE COMMUNICATIONS | 8:14622 |DOI: 10.1038/ncomms14622 |www.nature.com/naturecommunications
Construction of developmental lineage relationships in the mouse mammary gland by single-cell RNA profiling,NATURE COMMUNICATIONS | 8: 1627 | DOI: 10.1038/s41467-017-01560-x | www.nature.com/naturecommunications 3
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