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门冬酰胺酶(欧文)的鉴别方法

2023.5.17

(1)取本品5mg,加水1ml使溶解,加20%氢氧化钠溶液5ml,摇匀,再加1%硫酸铜溶液1滴,摇匀,溶液应显蓝紫色。

(2)照高效液相色谱法(通则0512)试验。供试品溶液取本品适量,加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含1mg的溶液对照品溶液取门冬酰胺酶(欧文)对照品,加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含1mg的溶液色谱条件用辛基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm250mm);以0.05%三氟醋酸溶液为流动相A,以三氟醋酸40%乙腈溶液(0.5:1000)为流动相B,按下表进行梯度洗脱;柱温为40℃;流速为每分钟1m;检测波长为220nm;进样体积20l。

时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)82测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图结果判定供试品溶液色谱图中主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。

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