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质粒DNA高频转化大肠杆菌实验——高频法

2019.4.08
实验材料

感受态细胞

试剂、试剂盒

质粒DNA抗生素

仪器、耗材

Ep管水浴锅LB平板

实验步骤

1、取新制备的一管感受态细胞。
 

2、取0.03 ml感受态细胞转和4 ng质粒DNA混匀,置冰浴30min
 

3、将 Ep管置于42 ℃水浴中热冲击2分钟,立即置于冰上1分钟。
 

4、在 Ep管中加70 ul LB培养基混匀,37 ℃培养30min
 

5、涂在含适当浓度抗生素的LB平板上。
 

6、37 ℃培养过夜,长出的菌斑既为阳性克隆。

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