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大肠杆菌O抗原,伤寒杆菌O抗原等的制备

2023.2.27

大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致,其定义为:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。

大肠菌群分布较广,在温血动物粪便和自然界广泛存在。调查研究表明,大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方,人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。粪便中多以典型大肠杆菌为主,而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。

大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的,主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。大肠菌群数的高低,表明了粪便污染的程度,也反映了对人体健康危害性的大小。粪便是人类肠道排泄物,其中有健康人粪便,也有肠道患者或带菌者的粪便,所以粪便内除一般正常细菌外,同时也会有一些肠道致病菌存在(如沙门氏菌、志贺氏菌等),因而食品中有粪便污染,则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性,潜伏着食物中毒和流行病的威胁,必须看作对人体健康具有潜在的危险性。

先经SS琼脂分离,种克氏双糖铁,18-24h后做OF和氧化酶试验,
发酵葡萄糖,氧化酶阴性的为肠杆菌科细菌
氧化葡萄糖,氧化酶阳性的为非发酵菌
发酵葡萄糖,氧化酶阳性的为孤菌科细
菌肠杆菌科细菌的鉴定方法:
1,取双糖斜面上的肠杆菌做玻片凝集试验,
A-G群沙门氏菌O多价诊断血清鉴别沙门氏菌.阳性者用沙门氏菌因子血清分型。
四种志贺氏多价和鲍氏多价诊断血清鉴别志贺氏并用志贺氏分型血清分型。
2生化反应分属:进行下述生化反应:
靛基质,甲基红,V-P,枸椽酸盐,流化氢,尿素酶,KCN,动力,明胶液化,赖氨酸脱羧酶,精氨酸双水解酶,鸟氨酸脱羧酶,苯丙氨脱氨酶,丙二酸钠,葡萄糖产气,乳糖,蕉糖,甘露醇,卫矛醇
水杨苷,侧金盏花醇,肌醇,山梨醇,阿拉佰糖,棉子糖,鼠李糖,
椐以上反应可将肠杆菌科的细菌分为14个属。
这14个属的细菌是
艾希氏菌属
志贺氏菌属
沙门氏菌属
枸椽酸盐杆菌菌属
克雷佰氏菌属
肠杆菌菌属
哈夫尼亚菌属
沙雷氏菌属
欧文氏菌属
爱德华氏菌属
变形杆菌菌属
摩根氏菌属
普罗菲登氏菌属
耶尔森氏菌属
各菌属中的细菌再按种的特性鉴别到种。
沙门氏菌的生化反应:
H2S 靛基质 Ph7.2尿素 KCN 赖氨酸脱羧酶 结果判定
+..... — .....—....... — .........+.......伤寒沙门氏
+.....—..... — ........—..........+ ..亚利桑那,沙门氏菌
—... — ..... — .....— .... +.. 甲型副伤沙门氏菌

志贺氏菌属的生化特性
动力 H2S 苯丙氨酸 赖氨酸脱羧酶 枸椽酸盐 葡铵
..—..—... — ......— ........— ......—
符合上述反应时再作群生化反应:
分群 ...........5%乳糖 甘露醇 棉子糖 3%甘油 靛基质
A群痢疾志贺氏菌...—........ —........— .....—......—
B群福氏志贺氏菌 . —....... +........ + ..... — ....+/—
C群鲍氏志贺氏菌 . —.......+......... — .....+ ....+/—
D群宋内氏志贺氏菌 + ........+ ........ + .....D .....—

伤寒副伤寒沙门氏菌的抗原结构
副伤寒甲沙门氏菌 O:2 , 12 H:a;1、5
副伤寒沙乙门氏菌 O:4[5],12 H:b;1、2
副伤寒沙丙门氏菌 O:6,7 H:c;1、5
伤寒沙门氏菌 O:9,12[VI] H:d;/

实在没办法打表格,还是自己去查书本吧!习惯的肠道致病菌从含铁双糖培养基上结合OF,氧化酶,赖氨酸脱羧酶, 尿素,枸椽酸盐,半固体等把非发酵菌和孤菌排除后,作沙门氏 菌\志贺氏菌\大肠艾希氏菌\变形杆菌\克雷佰氏菌等作出初步鉴别后,用编码法作出诊断.请你购肠道菌编码培养基,附有方法说明书,用起来很方便.我在疾控中心工作,现在我们购进法国生产的全自动化细菌鉴定仪分离到纯培养后,把菌液滴入培养管内4-8小时就出结果,20余种主要生化反应通过电脑软件给你打出,如果有疑问还会提醒再作几个生化,把补充结果或血清试验结果输入后就准确打印出细菌名称。

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