免疫沉淀的培养细胞的裂解实验_悬浮生长的细胞的裂解

2019.3.28

实验材料	细胞
实验步骤	①细胞在480g的离心力条件下离心10min，弃去上清。 ②用冷PBS洗细胞两次，然后将洗过的细胞置于冰上。 ③重新悬浮沉淀，使1.0ml裂解液（冷却到4℃)中含大约1X10⁷〜5X10⁷个细胞。 ④冰上孵育细胞15min，并不时地振动小管。 ⑤4℃条件下20000g离心裂解液10min。 ⑥小心地把上清移到另一个小管中，应确保不要碰到沉淀物。将裂解液置于冰上，以备免疫沉淀所用。细胞裂解液可以使用干冰和乙醇的混合物迅速冰冻，-70℃条件下可以长期储存。但是，通过免疫沉淀分离的蛋白复合物的分析，建议使用新制备的细胞裂解液。展开

实验材料

实验步骤

①细胞在480g的离心力条件下离心10min，弃去上清。

②用冷PBS洗细胞两次，然后将洗过的细胞置于冰上。

③重新悬浮沉淀，使1.0ml裂解液（冷却到4℃)中含大约1X10⁷〜5X10⁷个细胞。

④冰上孵育细胞15min，并不时地振动小管。

⑤4℃条件下20000g离心裂解液10min。

⑥小心地把上清移到另一个小管中，应确保不要碰到沉淀物。将裂解液置于冰上，以备免疫沉淀所用。细胞裂解液可以使用干冰和乙醇的混合物迅速冰冻，-70℃条件下可以长期储存。但是，通过免疫沉淀分离的蛋白复合物的分析，建议使用新制备的细胞裂解液。

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