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丙酮酸脱氢酶(硫辛酰胺)测定实验_氰铁酸为电子受体

2019.3.30
实验材料

酶样品

试剂、试剂盒

Tris-HClMgCl2丙酮酸二磷酸硫胺K3[Fe(CN)6]

仪器、耗材

分光光度计

实验步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」


0.98 ml 实验混合物


0.02 ml 酶样品


30 ℃ 时吸收值于 436 nm 处下降,吸收系数 ε436=755 l/(mol·cm)。



展开 
注意事项
其他

试剂:


0.05 mol/L Tris-HCl,pH 7.6


0.1 mol/L MgCl2(MgCl2·6H2O,Mr=203.3;203 mg 溶于 10 ml 水中)


0.1 mol/L 丙酮酸(丙酮酸钠,Mr=110.0;110 mg 溶于 10 ml 水中)


0.01 mol/L 二磷酸硫胺(ThDP,脱羧辅酶,Mr=460.8;46.1 mg 溶于 10 ml 水中)


0.1 mol/L K3[Fe(CN)6](Mr=329.2;330 mg 溶于 10 ml 水中)

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