关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验—蛋白质激酶C

2019.4.05
试剂、试剂盒

PKC 分析缓冲液组蛋白 HI 储存液磷脂酰丝氨酸甘油二油酸脂

实验步骤

1. 在冰浴的离心管内配制如下 20 μl 反应混合物:

5X PKC 分析缓冲液                                        4 μl

10 mg/ml 组蛋白 HI 储存液                             1 μl    

[γ-32P] ATP(终浓度 5 μCi/5 μmol/L ATP)      1 μl

水(取决于下一步所加的激酶样品的量)          0~14 μl 

5X PKC 分析缓冲液:

100 mmol/L Tris-HCl,30℃ 时(pH 7.5)

25 mmol/L MgCl2

1 mmol/L CaCl2

100 μg/ml 磷脂酰丝氨酸(PS)

10 μg/ml 甘油二油酸脂(Sigma)

2. 往预热的反应混合物中加入 1~14 μl 激酶样品,开始反应。

3. 于 30℃ 反应一定时间。

4. 分析反应产物。

展开


推荐
热点排行
一周推荐
关闭