自由活动大鼠静脉通路的建立与维护（一）

摘要: 　
目的　建立可靠的自由活动大鼠长期静脉输液通路。方法　在前人的基础上,对自由活动大鼠静脉通路的建立进行了改进和有益的探索。

结果　70 %的实验大鼠能顺利完成为期一个月的非连续输液实验,手术死亡率、感染率和管理脱落率较低。结论　本文所建立的大鼠静脉输液通路实用可靠。

关键词:大鼠; 自由活动; 静脉输液通路　医学科研活动需要各种动物模型,很多模型需在动物身上建立一条长期输液的静脉通路,并且要求能在动物清醒、自由活动时输液或采血[1 ] 。最常用的动物为大鼠,也有猴、猪、兔和小鼠等[2～4 ] 。临床上体液支持、静脉营养支持、静脉血压监测、严重创伤、多脏器功能障碍、物质成瘾的动物实验均需建立静脉通路[3 ,5 ,6 ] 。本文在前人的基础上,介绍一种可靠的、相对经济的大鼠静脉通路建立和维护的技术。

1 　动物

清洁级雄性Sprague2Dawley (SD) 大鼠30 只,手术时3 月龄,体重250～300 g ,由中南大学湘雅二医院动物实验室提供。

2 　相关器材及术前准备

2.1 　插管以及输液转轴

管道包括静脉留置聚氨酯管( Polyurethane Intravascular Tubing) BPU-T30 , 内径0.58 mm ,外径0.91 mm。聚乙烯管BPE-T20 ,内径0.38 mm ,外径1.09 mm ,这种规格的聚乙烯管管壁较厚,可抵抗一定强度的外力撕扯。输液管(COEXTM Tubing , BCOEX-T22 ) , 内径0.61 mm , 外径1.60 mm。这种输液管内层为聚乙烯PE ,阻力小,液体通过流畅,化学性质稳定,不会与输液成分发生化学反应;外层为聚氯乙烯PVC ,抗撕扯性、耐久性好。整个输液系统的一个关键设备即输液转轴,既要能使液体通过,又要能使大鼠在笼中自由活动。输液转轴很好地解决了这一问题,它使液体通过的同时自身能做360 度旋转,阻力很小,加一个力臂,大鼠可轻松地在笼中活动。本实验所用的输液转轴型号为375/22 ,如图1 ,死腔(Dead volume) 为8μL ,摩擦力矩(Frictional torque) 为0.030 盎司2英寸oz-in (约2.160 g/cm) 。

两端可接输液管,右下部白色横杆为力臂,借助弹簧管与大鼠背部相连,注意两端为表面光滑的管道,没有螺纹,螺纹应为照片不清晰所致。

2.2 　固定和保护装置

要防止大鼠撕咬输液管道,必须要有保护和固定装置,输液转轴到大鼠背部的输液管道从一根25cm 长的弹簧管(电炉丝) 中间通过,弹簧管上端连输液转轴,下端连一个塑料件。大鼠输液在其两前肢上穿上一个由粘合布做成的马甲,马甲背部有一个塑料件,该塑料件可与弹簧管下端的塑料件对接,并有一个扣合装置。输液管从弹簧管内经塑料件到大鼠皮下再到颈外静脉,整个输液管无外露部分,故能有效防止大鼠撕咬。整个通路如图2 所示,但固定带(Harness) 由自制的马甲代替。

2.3 　术前准备

将BPU 管剪成4 cm 长小段,BPE 管剪成10 cm长,BPU 管用三氯甲烷泡粗,一端套在BPE 管外面1cm ,组成13 cm 长管道。在连接部打一圈结,使之成“L”形,由于有一圈结,在“L”的拐角处有一个小圈。将做好的管子用75 %酒精浸泡消毒,并用生理盐水冲洗,手术前用生理盐水浸泡备用。1 mL 注射器针头作平头备用。准备眼科手术器材一套,硬膜外穿刺针一根,以便于在鼠背部与颈部打皮下隧道。

3 　手术过程

3.1 　分离静脉

大鼠手术时体重以250～280 g 为宜,用4 %戊巴比妥钠50 mgPkg 麻醉,同时给予阿托品013 mg/kg ,手术过程及术后注意保温。大鼠背部平肩胛处备皮,剪一小口,约1～2 mm 长,以备插管从背部穿出。翻转大鼠,头朝术者,颈部右侧备皮。从下颌至锁骨上缘纵形剪一小口,约2 cm 长,分离皮下组织,找到右侧颈外静脉(有的实验可选用股静脉[7 ] ) 并分离,滴适量生理盐水,防水干燥。

3.2 　插管

结扎静脉远心端,用眼科剪在静脉上剪一“V”形口,勿剪断静脉,先用一小段BPE-T10 管(内径0.28 mm ,外径0.60 mm) 插入静脉,因该管很细,插入较容易,再用BPE-T10 将“V”形口挑大一些,“L”形管远端连1 mL 注射器,注射器针头为平头,插管前端剪成斜面,管内注满生理盐水。用镊子夹住BPU-T30 插入“V”形口,插入静脉3.5～4.0 cm。

3.3 　固定插管

在静脉上打结固定插管,因为血管内的插管有1 cm 的BPU 管是套在BPE 管外面,而BPE-T20 管壁较厚,故在此段血管上打结可稍用力,使固定牢固,而不用担心管腔会被扎闭。用手术缝针在插管小圈内连线,将其缝在血管旁边的肌肉上,线圈要稍宽松,以防肌肉坏死。